Ба самаранокназорат бар зидди хомӯшакҳова кам кардани паҳншавии бемориҳое, ки онҳо интиқол медиҳанд, алтернативаҳои стратегӣ, устувор ва аз ҷиҳати экологӣ тоза ба пеститсидҳои кимиёвӣ заруранд.Мо хўроки тухмиро аз баъзе Brassicaceae (оилаи Brassica) ҳамчун манбаи изотиоцианатҳои аз растанӣ ҳосилшуда, ки дар натиҷаи гидролизи ферментативии глюкозинолатҳои аз ҷиҳати биологӣ ғайрифаъол барои истифода дар мубориза бо Аедҳои Миср истифода мешаванд, арзёбӣ кардем (L., 1762).Хӯроки тухмии панҷ-равған (Brassica juncea (L) Czern., 1859, Lepidium sativum L., 1753, Sinapis alba L., 1753, Thlaspi arvense L., 1753 ва Thlaspi arvense - се намуди асосии деактиватсияи термикӣ ва химиявии ферментативӣ) маҳсулот Барои муайян кардани заҳролудшавӣ (LC50) аз аллил изотиоцианат, бензил изотиоцианат ва 4-гидроксибензилизотиоцианат ба Тухми Aedes aegypti дар таъсири 24 соат = 0,04 г/120 мл dH2O).Қиматҳои LC50 барои хардал, хардал сафед ва думи асп.орди тухмӣ мутаносибан 0,05, 0,08 ва 0,05 дар муқоиса бо изотиоцианати аллил (LC50 = 19,35 ppm) ва 4 буд.Ин натичахо ба истехсоли шонаи тухми юнучка мувофиканд.Самаранокии баландтари эфирҳои бензил ба арзишҳои ҳисобшудаи LC50 мувофиқат мекунад.Истифодаи орди тухмӣ метавонад усули самараноки мубориза бо магасҳоро таъмин кунад.самаранокии хокаи тухмии хачкаш ва ҷузъҳои асосии кимиёвии он бар зидди кирми магасҳо ва нишон медиҳад, ки чӣ гуна пайвастагиҳои табиии хокаи тухмии салиб метавонад ҳамчун ларвициди ояндадори аз ҷиҳати экологӣ тоза барои мубориза бо магас хизмат кунанд.
Бемориҳои векторӣ, ки аз хомӯшакҳои Aedes ба вуҷуд меоянд, ҳамчун мушкилоти асосии ҷаҳонии тандурустии ҷамъиятӣ боқӣ мемонанд.Ҳодисаҳои бемориҳои магасҳо аз ҷиҳати ҷуғрофӣ паҳн мешаванд1,2,3 ва дубора пайдо мешаванд, ки боиси сар задани бемориҳои вазнин мегардад4,5,6,7.Паҳншавии бемориҳо дар байни одамон ва ҳайвонот (масалан, чикунгуния, денге, табларзаи водии Рифт, табларзаи зард ва вируси Зика) бесобиқа аст.Танҳо вараҷаи Денге тақрибан 3,6 миллиард нафарро дар минтақаҳои тропикӣ зери хатари сироят қарор медиҳад ва тахминан 390 миллион сироятҳо ҳамасола рух медиҳанд, ки дар натиҷа 6,100-24,300 нафар дар як сол фавтидаанд8.Пайдо ва хуруҷи вируси Зика дар Амрикои Ҷанубӣ ба далели осеби мағзи сар дар кӯдаконе, ки аз занони мубталои сироятшуда ба дунё омадааст, таваҷҷуҳи ҷаҳониёнро ба худ ҷалб кардааст2.Кремер ва дигарон 3 пешгӯӣ мекунанд, ки доираи ҷуғрофии хомӯшакҳои Aedes идома хоҳад ёфт ва то соли 2050 нисфи аҳолии ҷаҳон ба хатари сирояти арбовирусҳои магасҳо дучор мешаванд.
Ба истиснои ваксинаҳои ба наздикӣ таҳияшуда бар зидди бемории денге ва табларзаи зард, ваксинаҳо бар зидди аксари бемориҳои магасҳо то ҳол таҳия карда нашудаанд9,10,11.Ваксинаҳо то ҳол дар миқдори маҳдуд мавҷуданд ва танҳо дар озмоишҳои клиникӣ истифода мешаванд.Мубориза бар зидди векторҳои магасҳо бо истифода аз ҳашароти синтетикӣ стратегияи асосии мубориза бо паҳншавии бемориҳои магасҳо буд12,13.Ҳарчанд пеститсидҳои синтетикӣ дар куштани хомӯшакҳо самараноканд, аммо истифодаи доимии пеститсидҳои синтетикӣ ба организмҳои ғайриҳадаф таъсири манфӣ мерасонад ва муҳити зистро олуда мекунад14,15,16.Тамоюли афзоиши муқовимати магасҳо ба инсектисидҳои кимиёвӣ17,18,19 боз ҳам нигаронкунандатар аст.Ин мушкилоти марбут ба пеститсидҳо ҷустуҷӯи алтернативаҳои муассир ва аз ҷиҳати экологӣ тозаро барои мубориза бо векторҳои бемориҳо суръат бахшиданд.
Растаниҳои гуногун ҳамчун манбаи фитопестсидҳо барои мубориза бо ҳашароти зараррасон таҳия карда шудаанд20,21.Моддаҳои растанӣ ба таври умум аз ҷиҳати экологӣ тоза мебошанд, зеро онҳо биодобшавандаанд ва заҳролудшавӣ ба организмҳои ғайриҳадаф ба монанди ширхӯрон, моҳӣ ва амфибияҳо кам ё ночиз доранд20,22.Тайёрҳои гиёҳӣ маълуманд, ки пайвастагиҳои гуногуни биологӣ бо механизмҳои гуногуни амал барои назорати самараноки марҳилаҳои гуногуни ҳаёти магасҳо истеҳсол мекунанд23,24,25,26.Пайвастагиҳои аз растанӣ ҳосилшуда ба монанди равғанҳои эфирӣ ва дигар компонентҳои фаъоли растанӣ таваҷҷуҳи худро ба даст оварда, барои воситаҳои инноватсионии назорат кардани векторҳои магас роҳ кушод.Равғанҳои эфирӣ, монотерпенҳо ва сесквитерпенҳо ҳамчун репеллентҳо амал мекунанд, ки монеаҳо ва овицидҳоро ғизо медиҳанд27,28,29,30,31,32,33.Бисёре аз равғанҳои растанӣ боиси марги кирми магасҳо, лӯхтакҳо ва калонсолон 34,35,36 шуда, ба системаи асаб, роҳи нафас, эндокринӣ ва дигар системаҳои муҳими ҳашарот таъсир мерасонанд37.
Тадқиқотҳои охирин дар бораи истифодаи эҳтимолии растаниҳои хардал ва тухми онҳо ҳамчун манбаи пайвастагиҳои биоактивӣ фаҳмиш доданд.Хӯроки тухми хардал ҳамчун биофумигант озмуда шудааст38,39,40,41 ва ҳамчун ислоҳи хок барои нест кардани алафҳои бегона42,43,44 ва мубориза бо микроорганизмҳои патогении растанӣ аз хок 45,46,47,48,49,50, ғизодиҳии растанӣ истифода мешавад.нематодҳо 41,51, 52, 53, 54 ва ҳашароти зараррасон 55, 56, 57, 58, 59, 60. Фаъолияти фунгицидии ин хокаҳои тухмӣ ба пайвастагиҳои муҳофизаткунандаи растанӣ, ки изотиоцианатҳо ном доранд, алоқаманд аст38,42,60.Дар растаниҳо, ин пайвастагиҳои муҳофизатӣ дар ҳуҷайраҳои растанӣ дар шакли глюкозинолатҳои ғайрибиоактивӣ нигоҳ дошта мешаванд.Аммо, вақте ки растаниҳо аз ғизодиҳии ҳашарот ё сирояти патоген зарар мебинанд, глюкозинолатҳо тавассути мирозиназа ба изотиоцианатҳои биоактивӣ гидролиз мешаванд55,61.Изотиоцианатҳо пайвастагиҳои идоранашаванда мебошанд, ки маълум аст, ки доираи васеи зиддимикробӣ ва инсектисидӣ доранд ва сохтор, фаъолияти биологӣ ва мундариҷаи онҳо дар байни навъҳои Brassicaceae ба таври васеъ фарқ мекунанд42,59,62,63.
Гарчанде ки изотиоцианатҳое, ки аз орди хардал ба даст омадаанд, маълуманд, ки фаъолияти инсектисидӣ доранд, маълумот дар бораи фаъолияти биологӣ бар зидди векторҳои аз нигоҳи тиббӣ муҳими буғумҳо мавҷуд нест.Таҳқиқоти мо фаъолияти ларвицидии чор хокаи тухмии фарбеҳро бар зидди хомӯшакҳои Aedes тафтиш кард.Тухми Aedes aegypti.Ҳадафи тадқиқот арзёбии истифодаи эҳтимолии онҳо ҳамчун биопессидҳои аз ҷиҳати экологӣ тоза барои мубориза бо магасҳо буд.Се ҷузъи асосии кимиёвии орди тухмӣ, изотиоцианати аллил (AITC), бензил изотиоцианат (BITC) ва 4-гидроксибензилизотиоцианат (4-HBITC) низ барои санҷиши фаъолияти биологии ин ҷузъҳои кимиёвӣ дар кирми магас озмуда шуданд.Ин аввалин гузоришест, ки самаранокии чор хокаи тухми карам ва ҷузъҳои асосии кимиёвии онҳоро бар зидди кирми магас арзёбӣ мекунад.
Колонияҳои лаборатории Aedes aegypti (штамм Рокфеллер) дар ҳарорати 26°C, намии нисбӣ 70% (RH) ва 10:14 соат (фотопериоди L:D) нигоҳ дошта шуданд.Духтарони ҷуфтшуда дар қафасҳои пластикӣ (қадаш 11 см ва диаметри 9,5 см) ҷойгир карда шуданд ва тавассути системаи ғизодиҳии шиша бо истифода аз хуни цитратии гов (HemoStat Laboratories Inc., Dixon, CA, ИМА) ғизо дода шуданд.Гирифтани хун ба таври маъмулӣ бо истифода аз фидерҳои бисёр шишаи мембрана (Chemglass, Life Sciences LLC, Vineland, NJ, ИМА) ба найчаи обгузари обӣ (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, ИМА) бо ҳарорат пайваст карда шуд. назорати 37 ° C.Плёнкаи Parafilm M-ро ба поёни ҳар як камераи ғизодиҳии шишагӣ (масоҳати 154 мм2) дароз кунед.Пас аз он ҳар як ғизодиҳанда ба шабакаи боло ҷойгир карда шуд, ки қафаси дорои зани ҷуфтшавандаро фаро мегирад.Тақрибан 350-400 мкл хуни гов ба воҳиди шишагин бо истифода аз пипети Пастер (Fisherbrand, Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) илова карда шуд ва кирмҳои калонсол ҳадди аққал як соат холӣ карда шуданд.Сипас ба духтарони ҳомила маҳлули 10% сахароза дода шуд ва иҷозат доданд, ки дар коғази филтри таре, ки дар пиёлаҳои инфиродии суфлеи ултра равшан ҷойгир шудаанд (ҳаҷми Dart Container Corp., Мейсон, MI, ИМА) гузоранд.қафас бо об.Коғази филтри дорои тухмро дар халтаи пӯшида ҷойгир кунед (SC Johnsons, Racine, WI) ва дар ҳарорати 26°С нигоҳ доред.Тухмҳо аз тухм баромаданд ва тақрибан 200-250 Тухм дар ҷўйборҳои пластикӣ парвариш карда шуданд, ки дорои омехтаи харгӯш (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, ИМА) ва хокаи ҷигар (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, ИМА).ва филеи моҳӣ (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Олмон) дар таносуби 2: 1: 1.Тухми охирини давраи сеюм дар биосанҷиҳои мо истифода шуд.
Маводи тухмии растании дар ин тадқиқот истифодашуда аз манбаъҳои тиҷоратӣ ва ҳукуматӣ гирифта шудааст: Brassica juncea (хардал қаҳваранг-Тиллои уқёнуси Ором) ва Brassica juncea (хардал сафед-Тиллои Ида) аз Кооперативи фермерҳои шимолу ғарбии Уқёнуси Ором, иёлати Вашингтон, ИМА;(Garden Cress) аз Kelly Seed and Hardware Co., Peoria, IL, ИМА ва Thlaspi arvense (Field Pennycress-Elisabeth) аз USDA-ARS, Пеория, IL, ИМА;Ҳеҷ кадоме аз тухмии дар тадқиқот истифодашуда бо пеститсидҳо коркард карда нашудааст.Ҳама маводи тухмӣ дар ин таҳқиқот мувофиқи қоидаҳои маҳаллӣ ва миллӣ ва мувофиқи ҳама қоидаҳои дахлдори маҳаллӣ ва миллӣ коркард ва истифода шуданд.Ин тадқиқот навъҳои трансгении растаниро тафтиш накардааст.
Тухмиҳои Brassica juncea (PG), юнучқа (Ls), хардал сафед (IG), Thlaspi arvense (DFP) бо истифода аз осиёби ултрацентрифугаи Retsch ZM200 (Retsch, Haan, Олмон), ки бо тори 0,75 мм ва зангногир муҷаҳҳаз шудаанд, то хокаи хубе хок карда шуданд. ротори пӯлод, 12 дандон, 10,000 чархзанӣ (Ҷадвали 1).Хокаи тухмии заминӣ ба чӯбчаи коғазӣ гузаронида шуд ва бо гексан дар дастгоҳи Soxhlet барои 24 соат равѓан карда шуд.Намунаи зернамуди хардалҳои саҳроӣ дар ҳарорати 100 °C барои 1 соат коркард карда шуд, то мирозиназаро денатурат кунад ва гидролизи глюкозинолатҳоро ба вуҷуд оварад, то изотиоцианатҳои аз ҷиҳати биологӣ фаъолро пешгирӣ кунад.Хокаи тухмии бо гармии коркардшуда (DFP-HT) ҳамчун назорати манфӣ тавассути денатуризатсияи мирозиназа истифода шуд.
Мазмуни глюкозинолати орди тухмии равғаниншуда дар се нусха бо истифода аз хроматографияи моеъи баландсифат (HPLC) тибқи протоколи қаблан нашршуда 64 муайян карда шуд.Ба таври мухтасар, 3 мл метанол ба намунаи 250 мг хокаи тухмии равғаниншуда илова карда шуд.Ҳар як намуна дар ваннаи об барои 30 дақиқа соника карда шуд ва дар торикӣ дар 23 ° C барои 16 соат гузошта шуд.Пас аз 1 мл аликвоти қабати органикӣ тавассути филтри 0,45 мкм ба автомати намуна филтр карда шуд.Дар системаи Shimadzu HPLC кор мекунад (ду насоси LC 20AD; SIL 20A автоматӣ; дегазатори DGU 20As; детектори SPD-20A UV-VIS барои назорат дар 237 нм; ва модули автобуси коммуникатсионӣ CBM-20A), миқдори глюкозинолат дар тухми тухмӣ муайян карда шуд. дар се нусха.бо истифода аз нармафзори Shimadzu LC Solution версияи 1.25 (Shimadzu Corporation, Колумбия, MD, ИМА).Сутун як сутуни марҳилаи баръакси C18 Inertsil буд (250 мм × 4,6 мм; RP C-18, ODS-3, 5u; GL Sciences, Torrance, CA, ИМА).Шароити марҳилаи ибтидоии мобилӣ дар 12% метанол/88% 0,01 М гидроксиди тетрабутиламмоний дар об (TBAH; Sigma-Oldrich, Сент-Луис, МО, ИМА) бо суръати ҷараёни 1 мл/дақ муқаррар карда шуд.Пас аз тазриқи 15 мкл намуна, шароити ибтидоӣ барои 20 дақиқа нигоҳ дошта шуд ва сипас таносуби ҳалкунанда ба 100% метанол танзим карда шуд, ки вақти умумии таҳлили намуна 65 дақиқа буд.Каҷи стандартӣ (дар асоси nM/mAb) тавассути ҳалкунии пайдарпайи стандартҳои нав омодашудаи синапин, глюкозинолат ва мирозин (Сигма-Олдрих, Сент-Луис, МО, ИМА) барои ҳисоб кардани миқдори сулфури орди тухмии равғаниншуда тавлид карда шуд.глюкозинолатҳо.Консентратсияи глюкоза дар намунаҳо дар Agilent 1100 HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, ИМА) бо истифода аз версияи OpenLAB CDS ChemStation (C.01.07 SR2 [255]), ки бо ҳамон сутун муҷаҳҳаз ва бо истифода аз усули қаблан тавсифшуда санҷида шуд.Консентратсияи глюкоза муайян карда шуд;байни системаҳои HPLC муқоисашаванда бошад.
Аз Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ИМА) аллил изотиоцианат (94%, устувор) ва бензил изотиоцианат (98%) харида шудаанд.4-Hydroxybenzylisothiocyanate аз ChemCruz (Santa Cruz Biotechnology, CA, ИМА) харида шудааст.Ҳангоми ферментативӣ тавассути мирозиназа гидролиз шудани глюкозинолатҳо, глюкозинолатҳо ва глюкозинолатҳо мутаносибан аллил изотиоцианат, бензилизотиоцианат ва 4-гидроксибензилизотиоцианатро ташкил медиҳанд.
Аз руи методи Мутури ва дигарон биологи-хои лабораторй гузаронда шуданд.32 бо тағйирот.Дар тадқиқот панҷ хўроки тухмии камравған истифода шуд: DFP, DFP-HT, IG, PG ва Ls.Бист Тухмича дар як стакан сетарафаи 400 мл (VWR International, LLC, Radnor, PA, ИМА) ҷойгир карда шуданд, ки дорои 120 мл оби деионизатсияшуда (dH2O) мебошад.Ҳафт консентратсияи орди тухмӣ барои заҳролудшавии кирми магасҳо санҷида шуд: 0,01, 0,02, 0,04, 0,06, 0,08, 0,1 ва 0,12 г орди тухмӣ/120 мл dH2O барои орди тухмии DFP, DFP-HT, IG ва PG.Санҷишҳои пешакии биологӣ нишон медиҳанд, ки орди хушкшудаи Ls нисбат ба чор орди тухмии дигар санҷидашуда заҳролудтар аст.Аз ин рӯ, мо ҳафт консентратсияи коркарди орди тухмии Ls-ро ба консентратсияи зерин танзим кардем: 0,015, 0,025, 0,035, 0,045, 0,055, 0,065 ва 0,075 г/120 мл dH2O.
Гурӯҳи назоратии коркарднашуда (dH20, иловаи хӯроки тухмӣ) барои арзёбии фавти муқаррарии ҳашарот дар шароити таҳлил дохил карда шуд.Санҷишҳои биологии токсикологӣ барои ҳар як тухми тухмӣ се стакани такрории се нишеб (20 кирми давраи сеюм дар як шиша), барои ҳамагӣ 108 шиша иборат буд.Контейнерҳои коркардшуда дар ҳарорати хонагӣ (20-21 ° C) нигоҳ дошта шуданд ва марги кирм дар давоми 24 ва 72 соати таъсири пайвастаи консентратсияи табобат ба қайд гирифта шуд.Агар хангоми сурох кардан ё ламс кардан бо шпатели тунуки аз пулоди зангногир бадан ва замимхои магас харакат накунанд, кирми магас мурда ба хисоб меравад.Тухми мурда одатан дар қаъри зарф ё рӯи об дар ҳолати дорсалӣ ё вентралӣ бе ҳаракат мемонанд.Таҷриба дар рӯзҳои гуногун бо истифода аз гурӯҳҳои гуногуни кирмҳо се маротиба такрор карда шуд, ки дар маҷмӯъ 180 кирм ба ҳар як консентратсияи табобат дучор шуданд.
Заҳролудшавии AITC, BITC ва 4-HBITC ба Тухми магасҳо бо истифода аз ҳамон як усули биоанализ, вале бо табобатҳои гуногун арзёбӣ карда шуд.Барои ҳар як моддаи кимиёвӣ 100,000 ppm маҳлулҳои захиравӣ тайёр кунед, бо илова кардани 100 мкл кимиёвӣ ба 900 мкл этаноли мутлақ дар найчаи сентрифугаи 2 мл ва 30 сония ҷунбонда, барои ҳамаҷониба омехта кунед.Консентратсияи табобат дар асоси биологии пешакии мо муайян карда шуд, ки BITC нисбат ба AITC ва 4-HBITC хеле заҳролудтар аст.Барои муайян кардани заҳролудшавӣ, 5 консентратсияи BITC (1, 3, 6, 9 ва 12 ppm), 7 консентратсияи AITC (5, 10, 15, 20, 25, 30 ва 35 ppm) ва 6 консентратсияи 4-HBITC (15) , 15, 20, 25, 30 ва 35 дакика).30, 45, 60, 75 ва 90 дакика).Табобати назоратӣ бо 108 мкл этаноли мутлақ ворид карда шуд, ки ба ҳадди ниҳоии коркарди кимиёвӣ баробар аст.Санҷишҳои биологӣ ба таври дар боло зикршуда такрор карда шуданд, ки дар як консентратсияи табобат ҳамагӣ 180 кирминаро ошкор карданд.Сатҳи марги кирмҳо барои ҳар як консентратсияи AITC, BITC ва 4-HBITC пас аз 24 соати таъсири доимӣ сабт карда шуд.
Таҳлили пробити 65 маълумоти вобаста ба вояи фавт бо истифода аз нармафзори Polo (Polo Plus, LeOra Software, версияи 1.0) барои ҳисоб кардани 50% консентратсияи марговар (LC50), 90% консентратсияи марговар (LC90), нишеб, коэффисиенти вояи марговар ва 95 гузаронида шуд. % консентратсияи марговар.дар асоси фосилаҳои эътимод барои таносуби вояи марговар барои консентратсияи лог-тағйирёфта ва хатҳои вояи фавт.Маълумот дар бораи фавт ба маълумоти якҷояи такрории 180 кирм, ки ба ҳар як консентратсияи табобат дучор шудаанд, асос ёфтааст.Таҳлилҳои эҳтимолӣ барои ҳар як тухми тухмӣ ва ҳар як ҷузъи кимиёвӣ алоҳида гузаронида шуданд.Дар асоси фосилаи боварии 95% таносуби вояи марговар, заҳролудшавии орди тухмӣ ва ҷузъҳои кимиёвӣ ба Тухми магас ба таври назаррас фарқ мекард, аз ин рӯ фосилаи боварии дорои арзиши 1 ба таври назаррас фарқ надошт, P = 0,0566.
Натиҷаҳои HPLC барои муайян кардани глюкозинолатҳои асосии ордҳои равғаниншудаи тухмии DFP, IG, PG ва Ls дар ҷадвали 1 оварда шудаанд. Глюкозинолатҳои асосии ордҳои тухмии санҷидашуда ба истиснои DFP ва PG, ки ҳардуи онҳо глюкозинолатҳои мирозиназаро дар бар мегиранд, фарқ мекунанд.Мазмуни мирозин дар PG нисбат ба DFP зиёдтар буд, мутаносибан 33,3 ± 1,5 ва 26,5 ± 0,9 мг/г.Хокаи тухмии Ls дорои 36,6 ± 1,2 мг / г глюкогликон буд, дар ҳоле ки хокаи тухмии IG 38,0 ± 0,5 мг / г синапин дошт.
Тухми Аэ.Хомушакҳои Aedes aegypti ҳангоми коркард бо орди тухмии равғаниншуда кушта шуданд, гарчанде ки самаранокии табобат вобаста ба намуди растанӣ фарқ мекард.Танҳо DFP-NT пас аз 24 ва 72 соати таъсир ба кирми магас заҳролуд набуд (Ҷадвали 2).Заҳролудшавии хокаи тухмии фаъол бо афзоиши консентратсия зиёд шуд (расми 1А, В).Заҳролудшавии орди тухмӣ ба Тухми магасҳо дар асоси 95% CI таносуби вояи марговари арзишҳои LC50 дар арзёбии 24 соат ва 72 соат ба таври назаррас фарқ мекард (Ҷадвали 3).Пас аз 24 соат, таъсири заҳролудшавии орди тухмии Ls нисбат ба дигар табобатҳои орди тухмӣ бештар буд, бо баландтарин фаъолият ва заҳролудшавии максималӣ ба Тухми (LC50 = 0,04 г/120 мл dH2O).Тухмҳо нисбат ба коркарди хокаи тухмии IG, Ls ва PG дар давоми 24 соат ба DFP камтар ҳассос буданд, ки арзишҳои LC50 мутаносибан 0,115, 0,04 ва 0,08 г/120 мл dH2O, ки аз ҷиҳати оморӣ аз арзиши LC50 баландтар буданд.0,211 г/120 мл dH2O (Ҷадвали 3).Қиматҳои LC90-и DFP, IG, PG ва Ls мутаносибан 0,376, 0,275, 0,137 ва 0,074 г/120 мл dH2O буданд (Ҷадвали 2).Консентратсияи баландтарини DPP 0,12 г/120 мл dH2O буд.Пас аз 24 соати баҳодиҳӣ, марги миёнаи кирмина танҳо 12 фоизро ташкил дод, дар ҳоле ки фавти миёнаи кирми IG ва PG мутаносибан ба 51 фоиз ва 82 фоиз расид.Пас аз 24 соати арзёбӣ, марги миёнаи кирмҳо барои консентратсияи баландтарини коркарди орди тухмии Ls (0,075 г/120 мл dH2O) 99% буд (расми 1А).
Хатти каҷҳои фавт аз рӯи вокуниши вояи (Probit) Ae ҳисоб карда шуданд.Тухми мисрӣ (тухми давраи 3-юм) ба консентратсияи орди тухмӣ 24 соат (A) ва 72 соат (B) пас аз табобат.Хати нуқта LC50-и коркарди тухмии тухмиро ифода мекунад.DFP Thlaspi arvense, DFP-HT гармии ғайрифаъол Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Тиллои Уқёнуси Ором), Ls Lepidium sativum.
Дар арзёбии 72-соата, арзишҳои LC50-и тухмии DFP, IG ва PG мутаносибан 0,111, 0,085 ва 0,051 г/120 мл dH2O буданд.Тақрибан ҳамаи Тухмиҳое, ки ба орди тухмии Ls дучор шудаанд, пас аз 72 соати дучоршавӣ мурданд, аз ин рӯ маълумоти фавт бо таҳлили Probit мувофиқат намекарданд.Дар муқоиса бо дигар орди тухмӣ, кирмҳо ба коркарди орди тухмии DFP камтар ҳассос буданд ва аз ҷиҳати оморӣ баландтари LC50 арзиш доштанд (Ҷадвалҳои 2 ва 3).Пас аз 72 соат, арзишҳои LC50 барои коркарди тухмии DFP, IG ва PG мутаносибан 0,111, 0,085 ва 0,05 г/120 мл dH2O ҳисоб карда шуданд.Пас аз 72 соати арзёбӣ, арзишҳои LC90-и хокаҳои тухмии DFP, IG ва PG мутаносибан 0,215, 0,254 ва 0,138 г/120 мл dH2O буданд.Пас аз 72 соати арзёбӣ, марги миёнаи кирмина барои коркарди тухмии тухмии DFP, IG ва PG дар консентратсияи максималии 0,12 г/120 мл dH2O мутаносибан 58%, 66% ва 96% буд (расми 1В).Пас аз арзёбии 72-соата, орди тухмии PG нисбат ба орди тухмии IG ва DFP заҳролудтар аст.
Изотиоцианатҳои синтетикӣ, изотиоцианати аллилӣ (AITC), бензил изотиоцианат (BITC) ва 4-гидроксибензилизотиоцианат (4-HBITC) метавонанд кирми магасҳоро ба таври муассир кушанд.Дар 24 соати пас аз табобат, BITC барои кирмҳо бо арзиши LC50 5,29 ppm дар муқоиса бо 19,35 ppm барои AITC ва 55,41 ppm барои 4-HBITC заҳролудтар буд (Ҷадвали 4).Дар муқоиса бо AITC ва BITC, 4-HBITC заҳролудшавии камтар ва арзиши баландтари LC50 дорад.Дар заҳролудшавии кирми магасҳои ду изотиоцианати асосӣ (Ls ва PG) дар орди тухмии тавонотарин фарқиятҳои назаррас мавҷуданд.Заҳролудшавӣ дар асоси таносуби вояи марговари арзишҳои LC50 байни AITC, BITC ва 4-HBITC фарқияти оморӣ нишон дод, ки 95% CI таносуби вояи марговари LC50 арзиши 1-ро дар бар намегирад (P = 0,05, Ҷадвали). 4).Консентратсияи баландтарини ҳам BITC ва ҳам AITC тахмин зада шудааст, ки 100% Тухми санҷидашударо мекушад (Расми 2).
Хатти каҷҳои фавт аз рӯи вокуниши вояи (Probit) Ae ҳисоб карда шуданд.24 соат пас аз табобат, кирми мисрӣ (тухми давраи 3-юм) ба консентратсияи изотиоцианати синтетикӣ расид.Хати нуқта LC50-ро барои муолиҷаи изотиоцианат нишон медиҳад.Бензил изотиоцианати BITC, аллил изотиоцианати AITC ва 4-HBITC.
Истифодаи биопестисидҳои растанӣ ҳамчун агентҳои мубориза бар зидди векторҳои магас кайҳо боз омӯхта шудааст.Бисёре аз растаниҳо моддаҳои кимиёвии табиӣ истеҳсол мекунанд, ки фаъолияти инсектисидӣ доранд37.Пайвастҳои биоактивии онҳо алтернативаи ҷолибро ба инсектисидҳои синтетикӣ фароҳам меоранд, ки дар мубориза бар зидди ҳашароти зараррасон, аз ҷумла магасҳо потенсиали калон доранд.
Растаниҳои хардалро ҳамчун зироат барои тухми худ парвариш мекунанд, ҳамчун ҳанут ва манбаи равған истифода мешаванд.Вақте ки равғани хардал аз тухмҳо истихроҷ карда мешавад ё вақте ки хардал барои истифода ба сифати сӯзишвории биологӣ истихроҷ карда мешавад, 69 маҳсулоти иловагиаш орди тухмии равғаниншуда мебошад.Ин орди тухмӣ бисёр ҷузъҳои табиии биохимиявӣ ва ферментҳои гидролитикии худро нигоҳ медорад.Заҳролудшавии ин орди тухмӣ ба истеҳсоли изотиоцианатҳо мансуб аст55,60,61.Изотиоцианатҳо дар натиҷаи гидролизи глюкозинолатҳо тавассути ферменти мирозиназа ҳангоми гидратсияи тухми тухмҳо ҳосил мешаванд38,55,70 ва маълуманд, ки таъсири фунгисидӣ, бактерицидӣ, нематицидӣ ва инсектисидӣ, инчунин дигар хосиятҳо, аз ҷумла таъсироти ҳассосии кимиёвӣ ва химиотерапевтикӣ61,66, 70.Якчанд тадқиқотҳо нишон доданд, ки гиёҳҳои хардал ва орди тухмӣ ҳамчун фумигант бар зидди хок ва ҳашароти зараррасони ғизоии захирашуда самаранок амал мекунанд57,59,71,72.Дар ин таҳқиқот, мо заҳролуд будани орди чоргона ва се маҳсулоти биологии он AITC, BITC ва 4-HBITC-ро ба кирми магасҳои Aedes арзёбӣ кардем.Aedes aegypti.Интизор меравад, ки бевосита ба обе, ки тухми тухмии дорои кирми магасҳо дорад, равандҳои ферментативиро фаъол созанд, ки изотиоцианатҳоро ба вуҷуд меоранд, ки барои кирми магас заҳролуд ҳастанд.Ин биотрансформатсияро қисман бо фаъолияти мушоҳидашудаи ларвицидии орди тухмӣ ва гум шудани фаъолияти инсектисидӣ ҳангоми коркарди гармии орди хардал нишон дод.Интизор меравад, ки коркарди гармӣ ферментҳои гидролитикиро, ки глюкозинолатҳоро фаъол мекунанд, нобуд созад ва ба ин васила ташаккули изотиоцианатҳои биоактивиро пешгирӣ кунад.Ин аввалин тадқиқотест, ки хосиятҳои инсектисидии хокаи тухми карамро бар зидди хомӯшакҳо дар муҳити обӣ тасдиқ мекунад.
Дар байни хокаҳои тухмии санҷидашуда хокаи тухмии обдор (Ls) заҳролудтарин буд, ки боиси фавти баланди Aedes albopictus гардид.Тухми Aedes aegypti дар давоми 24 соат пайваста коркард карда шуд.Се хокаи тухмии боқимонда (PG, IG ва DFP) сусттар фаъолият доштанд ва пас аз 72 соати табобати пайваста боиси марги назаррас гардиданд.Танҳо орди тухмии Ls миқдори зиёди глюкозинолатҳоро дар бар мегирад, дар ҳоле ки PG ва DFP дорои мирозиназа ва IG глюкозинолат ҳамчун глюкозинолати асосӣ буданд (Ҷадвали 1).Глюкотропеолин ба BITC ва синалбин то 4-HBITC61,62 гидролиз мешавад.Натиҷаҳои биологии мо нишон медиҳанд, ки ҳам орди тухмии Ls ва ҳам BITC синтетикӣ барои кирми магас хеле заҳролуд мебошанд.Ҷузъи асосии орди тухмии PG ва DFP глюкозинолати мирозиназа мебошад, ки ба AITC гидролиз мешавад.AITC дар куштани кирми магасҳо бо арзиши LC50 19,35 ppm самаранок аст.Дар муқоиса бо AITC ва BITC, изотиоцианати 4-HBITC барои кирмҳо камтар заҳрнок аст.Гарчанде ки AITC нисбат ба BITC камтар заҳролуд аст, арзиши LC50 онҳо аз бисёр равғанҳои эфирӣ, ки дар кирми магасҳо озмуда шудаанд32,73,74,75 пасттар аст.
Хокаи тухмии хачвии мо барои истифода бар зидди кирми магас дорои як глюкозинолати асосӣ мебошад, ки беш аз 98-99% глюкозинолатҳои умумиро, ки аз ҷониби HPLC муайян шудааст, ташкил медиҳад.Миқдори микроэлементҳои дигар глюкозинолатҳо ошкор карда шуданд, аммо сатҳи онҳо камтар аз 0,3% аз миқдори умумии глюкозинолатҳоро ташкил дод.Дар таркиби тухмии обдор (L. sativum) глюкозинолатҳои дуюмдараҷа (синигрин) мавҷуд аст, аммо таносуби онҳо 1% аз миқдори умумии глюкозинолатҳоро ташкил медиҳад ва миқдори онҳо ҳанӯз ночиз аст (тақрибан 0,4 мг/г хокаи тухмӣ).Гарчанде ки PG ва DFP як глюкозинолати асосӣ (мирозин) доранд, фаъолияти ларвицидии хӯрокҳои тухмии онҳо аз сабаби арзишҳои LC50 ба таври назаррас фарқ мекунад.Дар заҳролудшавӣ ба милдиви хокӣ фарқ мекунад.Пайдоиши кирми Aedes aegypti метавонад аз фарқияти фаъолияти мирозиназа ё устувории байни ду ғизои тухмӣ бошад.Фаъолияти мирозиназа дар дастрасии биологии маҳсулоти гидролизӣ ба монанди изотиоцианатҳо дар растаниҳои Brassicaceae нақши муҳим мебозад76.Гузориши қаблии Pocock et al.77 ва Wilkinson et al.78 нишон доданд, ки тағирот дар фаъолият ва устувории мирозиназа низ метавонанд бо омилҳои ирсӣ ва муҳити зист алоқаманд бошанд.
Мазмуни пешбинишудаи изотиоцианати биоактивӣ дар асоси арзишҳои LC50 ҳар як тухми тухмӣ дар соатҳои 24 ва 72 (Ҷадвали 5) барои муқоиса бо барномаҳои мувофиқи кимиёвӣ ҳисоб карда шуд.Пас аз 24 соат, изотиоцианатҳо дар орди тухмӣ нисбат ба пайвастагиҳои пок заҳролудтар буданд.Қиматҳои LC50, ки дар асоси қисмҳои як миллион (ppm) коркарди тухмии изотиоцианат ҳисоб карда шудаанд, аз арзишҳои LC50 барои барномаҳои BITC, AITC ва 4-HBITC камтар буданд.Мо Тухмиҳоро мушоҳида кардем, ки донаҳои орди тухмиро истеъмол мекунанд (Расми 3А).Дар натиҷа, кирмҳо метавонанд тавассути хӯрдани донаҳои орди тухмӣ ба изотиоцианатҳои заҳролуд бештар дучор шаванд.Ин бештар дар коркарди тухмии тухмии IG ва PG дар таъсири 24 соат зоҳир шуд, ки дар он консентратсияи LC50 мутаносибан 75% ва 72% аз табобатҳои холиси AITC ва 4-HBITC камтар буд.Табобатҳои Ls ва DFP нисбат ба изотиоцианати холис заҳролудтар буданд ва арзишҳои LC50 мутаносибан 24% ва 41% камтар буданд.Тухми кирмак дар табобати назорат бомуваффақият pupated (расми 3B), дар ҳоле ки аксари Тухми дар коркарди орди тухмӣ пупа нашуданд ва рушди кирмчин хеле ба таъхир афтод (расми 3B,D).Дар Spodopteralitura, изотиоцианатҳо бо сустшавии афзоиш ва таъхири рушд алоқаманданд79.
Тухми Аэ.Хомушакҳои Aedes aegypti дар давоми 24-72 соат пайваста ба хокаи тухмии Brassica дучор мешуданд.$A) Тухми мурда бо заррањои орди тухмї дар узвњои дањон (додашуда);$B) Табобати назоратї (dH20 бе орди тухмии иловашуда) нишон медињад, ки Тухмињо муътадил месабзанд ва пас аз 72 соат пупа шудан мегиранд (C, D) Тухми бо орди тухмї коркардшуда;орди тухмй дар инкишофи он фарк нишон дод ва пупа набуд.
Мо механизми таъсири заҳрноки изотиоцианатҳоро ба кирми магасҳо наомухтаем.Бо вуҷуди ин, таҳқиқоти қаблӣ дар мӯрчагони оташи сурх (Solenopsis invicta) нишон доданд, ки ҷилавгирӣ аз глутатион S-трансфераза (GST) ва эстераза (EST) механизми асосии биофаъолияти изотиоцианатҳо мебошад ва AITC, ҳатто дар ҳолати паст, метавонад фаъолияти GST-ро боздорад. .мӯрчагон оташи сурх воридотӣ дар консентратсияи паст.Микдори он 0,5 мкг/мл80 аст.Баръакс, AITC ацетилхолинестеразаро дар ҷуворимаккаҳои калонсолон (Sitophilus zeamais) бозмедорад81.Барои равшан кардани механизми фаъолияти изотиоцианат дар кирми магасҳо таҳқиқоти шабеҳ бояд гузаронида шаванд.
Мо коркарди гармии ғайрифаъолшудаи DFP-ро барои дастгирӣ кардани пешниҳод истифода мебарем, ки гидролизи глюкозинолатҳои растанӣ барои ташаккули изотиоцианатҳои реактивӣ ҳамчун механизми мубориза бо кирми магас тавассути орди тухми хардал хизмат мекунад.Хӯроки тухмии DFP-HT дар сатҳи татбиқи озмоишшуда заҳролуд набуд.Лафарга ва дигарон.82 гузориш доданд, ки глюкозинолатҳо ба таназзул дар ҳарорати баланд ҳассосанд.Интизор меравад, ки коркарди гармӣ инчунин ферменти мирозиназаро дар орди тухмӣ денатурат кунад ва гидролизи глюкозинолатҳоро барои ташаккули изотиоцианатҳои реактивӣ пешгирӣ кунад.Инро Окунаде ва дигарон низ тасдиқ карданд.75 нишон дод, ки мирозиназа ба ҳарорат ҳассос аст ва нишон медиҳад, ки фаъолияти мирозиназа ҳангоми дучор шудан ба ҳарорати баланд аз 80° хардал, хардали сиёҳ ва тухми решаи хун комилан ғайрифаъол шудааст.C. Ин механизмҳо метавонанд боиси аз даст додани фаъолияти ҳашароти зараррасони орди тухмии бо гармӣ коркардшуда гардад.
Ҳамин тариқ, орди тухми хардал ва се изотиоцианатҳои асосии он барои кирми магас заҳролуд мебошанд.Бо назардошти ин фарқиятҳо байни орди тухмӣ ва коркарди кимиёвӣ, истифодаи орди тухмӣ метавонад як усули муассири мубориза бо магасҳо бошад.Зарур аст, ки формулаҳои мувофиқ ва системаҳои муассири интиқол барои беҳтар кардани самаранокӣ ва устувории истифодаи хокаи тухмӣ муайян карда шаванд.Натиҷаҳои мо нишон медиҳанд, ки истифодаи эҳтимолии орди тухми хардал ҳамчун алтернатива ба пестисидҳои синтетикӣ.Ин технология метавонад як воситаи инноватсионӣ барои назорати векторҳои магасҳо гардад.Азбаски Тухми магасҳо дар муҳити обӣ инкишоф меёбанд ва глюкозинолатҳои орди тухмӣ ҳангоми гидрататсия ба таври ферментативӣ ба изотиоцианатҳои фаъол мубаддал мешаванд, истифодаи орди хардал дар оби аз магас олудашуда потенсиали назарраси назоратро фароҳам меорад.Гарчанде ки фаъолияти ларвицидии изотиоцианатҳо гуногун аст (BITC > AITC > 4-HBITC), тадқиқоти бештар лозим аст, то муайян кунад, ки оё омехта кардани орди тухмӣ бо глюкозинолатҳои сершумор заҳролудро ба таври синергетикӣ зиёд мекунад.Ин аввалин тадқиқотест, ки таъсири инсектисидҳои орди тухми салчдор ва се изотиоцианати биоактивро ба хомӯшакҳо нишон медиҳад.Натиҷаҳои ин тадқиқот бо нишон додани он, ки орди тухмии карам, ки маҳсулоти иловагии истихроҷи равған аз тухмҳост, метавонад ҳамчун агенти ояндадори ларвицид барои мубориза бо магас хизмат кунад.Ин маълумот метавонад ба минбаъд кашф кардани агентҳои назорати биологии растанӣ ва рушди онҳо ҳамчун биопестисидҳои арзон, амалӣ ва аз ҷиҳати экологӣ тоза мусоидат кунад.
Маҷмӯи додаҳои барои ин таҳқиқот тавлидшуда ва таҳлилҳои натиҷавӣ аз муаллифи мувофиқ бо дархости оқилона дастрас карда мешаванд.Дар охири тадќиќот тамоми маводи дар тањќиќот истифодашуда (њашарот ва орди тухмї) нест карда шуданд.
Вақти фиристодан: июл-29-2024