Ташаккур барои боздид аз Nature.com. Версияи браузере, ки шумо истифода мебаред, дастгирии маҳдуди CSS дорад. Барои натиҷаҳои беҳтарин, мо тавсия медиҳем, ки шумо версияи нави браузери худро истифода баред (ё Реҷаи Мутобиқатро дар Internet Explorer ғайрифаъол кунед). Дар айни замон, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услубсозӣ ё JavaScript нишон медиҳем.
Омезишҳои пайвастагиҳои ҳашароти зараррасони аз растанӣ гирифташуда метавонанд таъсири мутақобилаи синергетикӣ ё антагонистиро нисбат ба ҳашароти зараррасон нишон диҳанд. Бо назардошти паҳншавии босуръати бемориҳои интиқолдиҳандаи пашшаҳои Aedes ва муқовимати афзояндаи популятсияҳои пашшаҳои Aedes ба инсектисидҳои анъанавӣ, бисту ҳашт комбинатсияи пайвастагиҳои терпенӣ дар асоси равғанҳои эфирии растанӣ дар асоси марҳилаҳои кирминавӣ ва калонсоли Aedes aegypti таҳия ва санҷида шуданд. Дар аввал панҷ равғани эфирии растанӣ (EO) аз ҷиҳати самаранокии кирминавӣ ва истифодаи калонсолон арзёбӣ карда шуданд ва дар ҳар як EO ду пайвастагии асосӣ дар асоси натиҷаҳои GC-MS муайян карда шуданд. Пайвастагиҳои асосии муайяншуда, яъне диалил дисульфид, диалил трисульфид, карвон, лимонен, эвгенол, метил эвгенол, эвкалиптол, эвдесмол ва алфа-пинени пашша, харидорӣ карда шуданд. Сипас комбинатсияҳои дугонаи ин пайвастагиҳо бо истифода аз вояҳои сублеталӣ омода карда шуданд ва таъсири синергетикӣ ва антагонистии онҳо санҷида ва муайян карда шуданд. Беҳтарин таркибҳои ларвитсидӣ бо роҳи омехта кардани лимонен бо диалил дисульфид ва беҳтарин таркибҳои ларвитсидӣ бо роҳи омехта кардани карвон бо лимонен ба даст оварда мешаванд. Ларвитсиди синтетикии истифодашавандаи тиҷоратӣ Темпос ва доруи барои калонсолон Малатион алоҳида ва дар комбинатсияҳои дуӣ бо терпеноидҳо санҷида шуданд. Натиҷаҳо нишон доданд, ки комбинатсияи темепос ва диалил дисульфид ва малатион ва эудесмол самараноктарин комбинатсия буд. Ин комбинатсияҳои пурқувват метавонанд бар зидди Aedes aegypti истифода шаванд.
Равғанҳои эфирии растанӣ (РЭР) метаболитҳои дуюмдараҷа мебошанд, ки дорои пайвастагиҳои гуногуни биоактивӣ мебошанд ва ҳамчун алтернатива ба пеститсидҳои синтетикӣ аҳамияти бештар пайдо мекунанд. Онҳо на танҳо барои муҳити зист ва барои истифодабаранда мувофиқанд, балки инчунин омехтаи пайвастагиҳои гуногуни биоактивӣ мебошанд, ки эҳтимолияти пайдоиши муқовимат ба доруро низ коҳиш медиҳад1. Бо истифода аз технологияи GC-MS, муҳаққиқон таркиби равғанҳои эфирии гуногуни растаниро таҳқиқ карданд ва зиёда аз 3000 пайвастагиро аз 17500 растании хушбӯй муайян карданд2, ки аксари онҳо аз ҷиҳати хосиятҳои инсектисидӣ санҷида шудаанд ва гузориш дода мешавад, ки таъсири инсектисидӣ доранд3,4. Баъзе таҳқиқот нишон медиҳанд, ки заҳролудии ҷузъи асосии пайвастагӣ бо оксиди этилени хоми он якхела ё аз он зиёдтар аст. Аммо истифодаи пайвастагиҳои алоҳида метавонад боз ҳам барои пайдоиши муқовимат ҷой гузорад, чунон ки дар мавриди инсектисидҳои кимиёвӣ5,6 рух медиҳад. Аз ин рӯ, таваҷҷӯҳи кунунӣ ба тайёр кардани омехтаҳои пайвастагиҳои дар асоси оксиди этилен барои беҳтар кардани самаранокии инсектисидӣ ва кам кардани эҳтимолияти муқовимат дар популятсияҳои мақсадноки ҳашарот равона карда шудааст. Пайвастагиҳои фаъоли инфиродӣ, ки дар EO мавҷуданд, метавонанд дар якҷоягӣ таъсири синергетикӣ ё антагонистӣ нишон диҳанд, ки фаъолияти умумии EO-ро инъикос мекунанд, ки ин далел дар таҳқиқоти муҳаққиқони қаблӣ хуб таъкид шудааст7,8. Барномаи назорати векторҳо инчунин EO ва ҷузъҳои онро дар бар мегирад. Фаъолияти зидди магасҳои равғанҳои эфирӣ дар бораи магасҳои Culex ва Anopheles ба таври васеъ омӯхта шудааст. Якчанд таҳқиқот кӯшиш кардаанд, ки пестисидҳои муассирро тавассути якҷоя кардани растаниҳои гуногун бо пестисидҳои синтетикии истифодашавандаи тиҷоратӣ барои афзоиши заҳролудшавии умумӣ ва кам кардани таъсири манфӣ таҳия кунанд9. Аммо таҳқиқоти чунин пайвастагиҳо бар зидди Aedes aegypti нодир боқӣ мемонанд. Пешрафтҳо дар илми тиб ва таҳияи доруҳо ва ваксинаҳо ба мубориза бо баъзе бемориҳои тавассути векторҳо интиқолшаванда мусоидат кардаанд. Аммо мавҷудияти серотипҳои гуногуни вирус, ки аз ҷониби магасҳои Aedes aegypti интиқол дода мешаванд, боиси нокомии барномаҳои эмгузаронӣ шудааст. Аз ин рӯ, вақте ки чунин бемориҳо рух медиҳанд, барномаҳои назорати векторҳо ягона роҳи пешгирии паҳншавии беморӣ мебошанд. Дар сенарияи кунунӣ, назорати Aedes aegypti хеле муҳим аст, зеро он вектори асосии вирусҳои гуногун ва серотипҳои онҳо мебошад, ки боиси таби денге, Зика, таби хунравии денге, таби зард ва ғайра мешаванд. Нуктаи муҳимтарини он ин аст, ки шумораи ҳолатҳои қариб ҳамаи бемориҳои тавассути векторҳо гузарандаи Aedes дар Миср ҳар сол ва дар саросари ҷаҳон афзоиш меёбад. Аз ин рӯ, дар ин замина, зарурати таъҷилии таҳияи чораҳои мубориза бо муҳити зист ва самаранок барои популятсияҳои Aedes aegypti вуҷуд дорад. Номзадҳои эҳтимолӣ дар ин робита EO, пайвастагиҳои таркибии онҳо ва комбинатсияҳои онҳо мебошанд. Аз ин рӯ, дар ин таҳқиқот кӯшиш карда шуд, ки комбинатсияҳои муассири синергетикии пайвастагиҳои асосии EO растанӣ аз панҷ растанӣ бо хосиятҳои ҳашароткушӣ (масалан, наъно, райҳони муқаддас, эвкалипти доғдор, сулфури аллиум ва мелалеука) бар зидди Aedes aegypti муайян карда шаванд.
Ҳамаи EO-ҳои интихобшуда фаъолияти эҳтимолии кирминацидиро бар зидди Aedes aegypti бо LC50 дар давоми 24 соат аз 0,42 то 163,65 ppm нишон доданд. Баландтарин фаъолияти кирминацидӣ барои EO-и пудинагӣ (Mp) бо арзиши LC50 0,42 ppm дар 24 соат сабт шудааст ва пас аз он сирпиёз (As) бо арзиши LC50 16,19 ppm дар 24 соат ба қайд гирифта шудааст (Ҷадвали 1).
Ба истиснои Ocimum Sainttum, Os EO, ҳамаи чор EO-и дигари санҷидашуда таъсири аллерсидии намоёнро нишон доданд, ки арзишҳои LC50 дар тӯли 24 соат таъсири онҳо аз 23.37 то 120.16 ppm буданд. EO-и Thymophilus striata (Cl) дар куштани калонсолон бо арзиши LC50 23.37 ppm дар давоми 24 соат пас аз таъсири он самараноктар буд, пас аз он Eucalyptus maculata (Em), ки арзиши LC50 101.91 ppm дошт (Ҷадвали 1). Аз тарафи дигар, арзиши LC50 барои Os ҳанӯз муайян нашудааст, зеро баландтарин сатҳи фавт 53% дар вояи баландтарин сабт шудааст (Расми иловагӣ 3).
Ду пайвастагии асосии таркибии ҳар як EO муайян ва интихоб карда шуданд, ки бар асоси натиҷаҳои пойгоҳи додаҳои китобхонаи NIST, фоизи масоҳати хроматограммаи GC ва натиҷаҳои спектрҳои MS (Ҷадвали 2) анҷом дода шуданд. Барои EO As, пайвастагиҳои асосии муайяншуда диалил дисульфид ва диалил трисульфид буданд; барои EO Mp, пайвастагиҳои асосии муайяншуда карвон ва лимонен, барои EO Em, пайвастагиҳои асосии муайяншуда эудесмол ва эвкалиптол буданд; Барои EO Os, пайвастагиҳои асосии муайяншуда эвгенол ва метил эвгенол ва барои EO Cl, пайвастагиҳои асосии муайяншуда эвгенол ва α-пинен буданд (Расми 1, Расми иловагӣ 5-8, Ҷадвали иловагӣ 1-5).
Натиҷаҳои спектрометрияи массавии терпеноидҳои асосии равғанҳои эфирии интихобшуда (А-диаллилдисульфид; В-диаллил трисульфид; С-эвгенол; D-метил эвгенол; Е-лимонен; F-цеперони ароматикӣ; G-α-пинен; H-цинол; R-эвдамол).
Дар маҷмӯъ нӯҳ пайвастагӣ (диаллил дисульфид, диаллил трисульфид, эвгенол, метил эвгенол, карвон, лимонен, эвкалиптол, эвдесмол, α-пинен) ҳамчун пайвастагиҳои муассир муайян карда шуданд, ки ҷузъҳои асосии EO мебошанд ва дар марҳилаҳои кирминагӣ бар зидди Aedes aegypti алоҳида биосанҷиш карда шуданд. Пайвастагии эвдесмол пас аз 24 соати таъсири LC50 бо арзиши 2.25 ppm баландтарин фаъолияти кирминагиро дошт. Пайвастагиҳои диаллил дисульфид ва диаллил трисульфид низ таъсири эҳтимолии кирминагиро доранд, ки миқдори миёнаи сублеталӣ дар диапазони 10-20 ppm мебошанд. Боз ҳам фаъолияти мӯътадили кирминагӣ барои пайвастагиҳои эвгенол, лимонен ва эвкалиптол бо арзишҳои LC50 63.35 ppm, 139.29 ppm мушоҳида карда шуд. ва мутаносибан 181.33 ppm пас аз 24 соат (Ҷадвали 3). Аммо, ҳатто дар вояҳои баландтарин ягон потенсиали назарраси ларвитсидии метил эвгенол ва карвон пайдо нашуд, аз ин рӯ арзишҳои LC50 ҳисоб карда нашуданд (Ҷадвали 3). Консентратсияи миёнаи марговари ларвитсиди синтетикии Temephos нисбат ба Aedes aegypti дар тӯли 24 соати таъсир 0.43 ppm дошт (Ҷадвали 3, Ҷадвали иловагии 6).
Ҳафт пайвастагӣ (диалилдисульфид, диалил трисульфид, эвкалиптол, α-пинен, эвдесмол, лимонен ва карвон) ҳамчун пайвастагиҳои асосии EO-и муассир муайян карда шуданд ва алоҳида бар зидди пашшаҳои калонсоли Мисри Aedes санҷида шуданд. Тибқи таҳлили регрессияи Probit, муайян карда шуд, ки Эудесмол дорои потенсиали баландтарин бо арзиши LC50 1.82 ppm ва баъдан Эукалиптол бо арзиши LC50 17.60 ppm дар вақти таъсири 24-соата қарор дорад. Панҷ пайвастагии боқимондаи санҷидашуда барои калонсолоне, ки LC50-ҳо аз 140.79 то 737.01 ppm буданд, мӯътадил зараровар буданд (Ҷадвали 3). Малатиони органикии синтетикӣ нисбат ба эудесмол камтар пурқувват ва нисбат ба шаш пайвастагии дигар баландтар буд, ки арзиши LC50 дар тӯли 24-соата 5.44 ppm буд (Ҷадвали 3, Ҷадвали иловагии 6).
Ҳафт пайвастагии пуриқтидори сурб ва тамефосати органофосфор барои тартиб додани комбинатсияҳои дуӣ аз вояҳои LC50 бо таносуби 1:1 интихоб карда шуданд. Дар маҷмӯъ 28 комбинатсияи дуӣ омода ва барои самаранокии кирминабидӣ бар зидди Aedes aegypti санҷида шуданд. Нӯҳ комбинатсия синергетикӣ, 14 комбинатсия антагонистӣ ва панҷ комбинатсия кирминабидӣ набуданд. Дар байни комбинатсияҳои синергетикӣ, комбинатсияи диалил дисульфид ва темофол самараноктарин буд ва фавти 100% пас аз 24 соат мушоҳида шуд (Ҷадвали 4). Ба ҳамин монанд, омехтаҳои лимонен бо диалил дисульфид ва эвгенол бо тиметфос потенсиали хубро бо фавти 98,3% мушоҳидашуда нишон доданд (Ҷадвали 5). 4 комбинатсияи боқимонда, яъне эудесмол ва эвкалиптол, эудесмол ва лимонен, эвкалиптол ва алфа-пинен, алфа-пинен ва темепос, низ самаранокии назарраси ларвисидӣ нишон доданд, ки сатҳи фавти мушоҳидашуда аз 90% зиёд аст. Сатҳи фавти пешбинишуда ба 60-75% наздик аст (Ҷадвали 4). Аммо, омезиши лимонен бо α-пинен ё эвкалипт аксуламалҳои антагонистӣ нишон дод. Ба ҳамин монанд, омехтаҳои Темефос бо эвгенол ё эвкалипт ё эудесмол ё диалил трисульфид таъсири антагонистӣ доранд. Ба ҳамин монанд, омезиши диалил дисульфид ва диалил трисульфид ва омезиши яке аз ин пайвастагиҳо бо эудесмол ё эвгенол дар таъсири ларвисидӣ антагонистӣ мебошанд. Антагонизм инчунин бо омезиши эудесмол бо эвгенол ё α-пинен гузориш шудааст.
Аз ҳамаи 28 омехтаи дуӣ, ки барои фаъолияти кислотавии калонсолон санҷида шудаанд, 7 комбинатсия синергетикӣ, 6-тоаш таъсир надошт ва 15-тоаш антагонистӣ буданд. Омехтаҳои эудесмол бо эвкалипт ва лимонен бо карвон нисбат ба дигар комбинатсияҳои синергетикӣ самараноктар буданд ва сатҳи фавт дар 24 соат мутаносибан 76% ва 100% буд (Ҷадвали 5). Мушоҳида шудааст, ки малатион бо ҳама комбинатсияҳои пайвастагиҳо ба истиснои лимонен ва диалил трисульфид таъсири синергетикӣ нишон медиҳад. Аз тарафи дигар, антагонизм байни диалил дисульфид ва диалил трисульфид ва комбинатсияи ҳардуи онҳо бо эвкалипт, ё эвкалиптол, ё карвон, ё лимонен мушоҳида шудааст. Ба ҳамин монанд, комбинатсияҳои α-пинен бо эудесмол ё лимонен, эвкалиптол бо карвон ё лимонен ва лимонен бо эудесмол ё малатион таъсири антагонистии ларвицидӣ нишон доданд. Барои шаш комбинатсияи боқимонда, байни фавти пешбинишуда ва мушоҳидашуда фарқияти назаррасе вуҷуд надошт (Ҷадвали 5).
Бар асоси таъсири синергетикӣ ва вояҳои зерлеталӣ, заҳролудии кирминазарии онҳо нисбат ба шумораи зиёди пашшаҳои Aedes aegypti дар ниҳоят интихоб ва минбаъд санҷида шуд. Натиҷаҳо нишон доданд, ки фавти кирминазарӣ бо истифода аз комбинатсияҳои дуӣ эвгенол-лимонен, диалил дисульфид-лимонен ва диалил дисульфид-тимофос 100% буд, дар ҳоле ки фавти пешбинишудаи кирминазарӣ мутаносибан 76,48%, 72,16% ва 63,4% буд (Ҷадвали 6). . Комбинатсияи лимонен ва эудесмол нисбатан камтар самаранок буд ва 88% фавти кирминазарӣ дар тӯли давраи таъсири 24-соата мушоҳида шуд (Ҷадвали 6). Хулоса, чор комбинатсияи дуӣ интихобшуда инчунин таъсири синергетикии кирминазариро нисбат ба Aedes aegypti ҳангоми истифодаи васеъ нишон доданд (Ҷадвали 6).
Се комбинатсияи синергетикӣ барои биоанализи калонсолон барои назорат кардани популятсияҳои калони Aedes aegypti интихоб карда шуданд. Барои интихоби комбинатсияҳо барои санҷиш дар колонияҳои калони ҳашарот, мо аввал ба ду комбинатсияи беҳтарини синергетикии терпенҳо, яъне карвон ва лимонен ва эвкалиптол ва эвдесмол тамаркуз кардем. Дуюм, беҳтарин комбинатсияи синергетикӣ аз комбинатсияи малатиони органикӣ фосфат ва терпеноидҳои синтетикӣ интихоб карда шуд. Мо боварӣ дорем, ки комбинатсияи малатион ва эвдесмол беҳтарин комбинатсия барои санҷиш дар колонияҳои калони ҳашарот мебошад, зеро фавти баландтарин ва арзишҳои хеле пасти LC50-и компонентҳои номзад мушоҳида мешаванд. Малатион синергизмро дар якҷоягӣ бо α-пинен, диалил дисульфид, эвкалипт, карвон ва эвдесмол нишон медиҳад. Аммо агар ба арзишҳои LC50 назар кунем, Эудесмол арзиши пасттарин дорад (2.25 ppm). Арзишҳои ҳисобшудаи LC50-и малатион, α-пинен, диалил дисульфид, эвкалиптол ва карвон мутаносибан 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 ва 140.79 ppm буданд. Ин арзишҳо нишон медиҳанд, ки омезиши малатион ва эудесмол аз ҷиҳати миқдор омезиши оптималӣ аст. Натиҷаҳо нишон доданд, ки омезиши карвон ва лимонен ва эудесмол ва малатион 100% фавти мушоҳидашударо дар муқоиса бо фавти пешбинишуда аз 61% то 65% дошт. Омезиши дигар, эудесмол ва эвкалиптол, сатҳи фавтро пас аз 24 соати таъсир 78.66% нишон дод, дар муқоиса бо сатҳи фавти пешбинишуда 60%. Ҳар се комбинатсияи интихобшуда таъсири синергетикиро ҳатто ҳангоми истифодаи васеъ бар зидди Aedes aegypti калонсолон нишон доданд (Ҷадвали 6).
Дар ин таҳқиқот, EO-ҳои растаниҳои интихобшуда, ба монанди Mp, As, Os, Em ва Cl, таъсири марговари умедбахшро ба марҳилаҳои кирминавӣ ва болиғи Aedes aegypti нишон доданд. Mp EO бо арзиши LC50 0.42 ppm баландтарин фаъолияти кирминавӣ дошт, пас аз он As, Os ва Em EO-ҳо бо арзиши LC50 камтар аз 50 ppm пас аз 24 соат қарор гирифтанд. Ин натиҷаҳо бо таҳқиқоти қаблии пашшаҳо ва дигар пашшаҳои диптерӣ мувофиқанд10,11,12,13,14. Гарчанде ки қувваи кирминавии Cl нисбат ба дигар равғанҳои эфирӣ пасттар аст, ки арзиши LC50 пас аз 24 соат 163.65 ppm аст, потенсиали болиғи он бо арзиши LC50 пас аз 24 соат баландтарин аст. ЭО-ҳои Mp, As ва Em низ потенсиали хуби аллерсидиро бо арзишҳои LC50 дар диапазони 100-120 ppm дар 24 соати таъсир нишон доданд, аммо нисбат ба самаранокии кирминабидии онҳо нисбатан пасттар буданд. Аз тарафи дигар, ЭО-ҳо ҳатто дар вояи баландтарини терапевтӣ таъсири ночизи аллерсидиро нишон доданд. Ҳамин тариқ, натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки заҳролудии оксиди этилен барои растаниҳо вобаста ба марҳилаи инкишофи пашшаҳо метавонад фарқ кунад15. Он инчунин аз суръати воридшавии ЭО ба бадани ҳашарот, таъсири мутақобилаи онҳо бо ферментҳои мушаххаси мақсаднок ва қобилияти детоксикатсиякунии пашша дар ҳар як марҳилаи рушд вобаста аст16. Шумораи зиёди таҳқиқот нишон доданд, ки пайвастагии асосии компонент омили муҳим дар фаъолияти биологии оксиди этилен мебошад, зеро он аксарияти умумии пайвастагиҳоро ташкил медиҳад3,12,17,18. Аз ин рӯ, мо дар ҳар як ЭО ду пайвастагии асосиро баррасӣ кардем. Бар асоси натиҷаҳои GC-MS, диалил дисульфид ва диалил трисульфид ҳамчун пайвастагиҳои асосии EO As муайян карда шуданд, ки бо гузоришҳои қаблӣ мувофиқ аст19,20,21. Гарчанде ки гузоришҳои қаблӣ нишон медоданд, ки ментол яке аз пайвастагиҳои асосии он аст, карвон ва лимонен боз ҳамчун пайвастагиҳои асосии Mp EO22,23 муайян карда шуданд. Профили таркиби Os EO нишон дод, ки эвгенол ва метил эвгенол пайвастагиҳои асосӣ мебошанд, ки ба натиҷаҳои тадқиқотчиёни қаблӣ монанд аст16,24. Эвкалиптол ва эвкалиптол ҳамчун пайвастагиҳои асосии мавҷуд дар равғани барги Em гузориш дода шудаанд, ки бо натиҷаҳои баъзе тадқиқотчиён25,26 мувофиқ аст, аммо бар хилофи натиҷаҳои Олаладе ва дигарон27. Бартарии цинол ва α-пинен дар равғани эфирии мелалеука мушоҳида шуд, ки ба таҳқиқоти қаблӣ монанд аст28,29. Тафовутҳои дохилиспецификӣ дар таркиб ва консентратсияи равғанҳои эфирӣ, ки аз як намуди растанӣ дар маконҳои гуногун истихроҷ карда мешаванд, гузориш дода шудаанд ва дар ин таҳқиқот низ мушоҳида шудаанд, ки аз шароити ҷуғрофии афзоиши растанӣ, вақти ҷамъоварӣ, марҳилаи рушд ё синну соли растанӣ таъсир мегиранд.22,30,31,32. Сипас пайвастагиҳои калидии муайяншуда харидорӣ ва барои таъсири кирминацидии онҳо ва таъсири онҳо ба пашшаҳои калонсоли Aedes aegypti санҷида шуданд. Натиҷаҳо нишон доданд, ки фаъолияти кирминацидии диалил дисульфид бо фаъолияти хоми EO As қобили муқоиса аст. Аммо фаъолияти диалил трисульфид нисбат ба EO As баландтар аст. Ин натиҷаҳо ба натиҷаҳои бадастомада аз ҷониби Kimbaris et al. 33 дар бораи Culex philippines монанданд. Аммо, ин ду пайвастагӣ фаъолияти хуби автосидиро нисбат ба пашшаҳои мақсаднок нишон надоданд, ки бо натиҷаҳои Plata-Rueda et al. 34 дар бораи Tenebrio molitor мувофиқ аст. Os EO нисбат ба марҳилаи кирмина Aedes aegypti самаранок аст, аммо нисбат ба марҳилаи калонсол не. Муайян карда шудааст, ки фаъолияти кирминацидии пайвастагиҳои асосии инфиродӣ нисбат ба Os EO хом пасттар аст. Ин маънои нақшро барои дигар пайвастагиҳо ва таъсири мутақобилаи онҳо дар оксиди этилени хом дорад. Метил эвгенол танҳо фаъолияти ночиз дорад, дар ҳоле ки эвгенол танҳо фаъолияти мӯътадили кирминацидӣ дорад. Ин хулоса, аз як тараф,35,36-ро тасдиқ мекунад ва аз тарафи дигар, бо хулосаҳои муҳаққиқони қаблӣ37,38 мухолиф аст. Тафовут дар гурӯҳҳои функсионалии эвгенол ва метилеугенол метавонад боиси заҳролудшавии гуногун барои як ҳашароти мақсаднок гардад39. Муайян карда шуд, ки лимонен фаъолияти мӯътадили кирминацидӣ дорад, дар ҳоле ки таъсири карвон ночиз буд. Ба ҳамин монанд, заҳролудшавии нисбатан пасти лимонен барои ҳашароти калонсол ва заҳролудшавии баланди карвон натиҷаҳои баъзе таҳқиқоти қаблиро40 дастгирӣ мекунанд, аммо ба дигарон41 мухолифанд. Мавҷудияти пайвандҳои дугона дар ҳам мавқеъҳои дохилисиклӣ ва ҳам экзосиклӣ метавонад манфиатҳои ин пайвастагиҳоро ҳамчун ларвисидҳо3,41 афзоиш диҳад, дар ҳоле ки карвон, ки кетон бо карбонҳои алфа ва бета сернашуда аст, метавонад дар калонсолон потенсиали заҳролудшавии бештарро нишон диҳад42. Аммо, хусусиятҳои инфиродии лимонен ва карвон нисбат ба миқдори умумии EO MP хеле пасттаранд (Ҷадвали 1, Ҷадвали 3). Дар байни терпеноидҳои санҷидашуда, эудесмол бо арзиши LC50 аз 2,5 ppm бузургтарин фаъолияти ларвисидӣ ва калонсолонро дорад, ки онро барои мубориза бо пашшаҳои Aedes як пайвастагии умедбахш мегардонад. Самаранокии он нисбат ба тамоми EO Em беҳтар аст, гарчанде ки ин бо натиҷаҳои Ченг ва дигарон мувофиқ нест40. Эудесмол як сесквитерпен бо ду воҳиди изопрен аст, ки нисбат ба монотерпенҳои оксигендор, ба монанди эвкалипт, камтар ноустувор аст ва аз ин рӯ, ҳамчун пестисид потенсиали бештар дорад. Худи эвкалиптол нисбат ба калонсолон фаъолияти бештари кирминацидӣ дорад ва натиҷаҳои таҳқиқоти қаблӣ ҳам инро дастгирӣ ва ҳам рад мекунанд37,43,44. Фаъолияти худ қариб ба фаъолияти тамоми EO Cl монанд аст. Монотерпени дигари бициклӣ, α-пинен, таъсири камтари калонсолонро ба Aedes aegypti нисбат ба таъсири кирминацидӣ дорад, ки баръакси таъсири пурраи EO Cl аст. Фаъолияти умумии инсектисидии терпеноидҳо аз липофилӣ, ноустуворӣ, шохабандии карбон, масоҳати проексия, масоҳати сатҳ, гурӯҳҳои функсионалӣ ва мавқеъҳои онҳо таъсир мерасонад45,46. Ин пайвастагиҳо метавонанд бо нобуд кардани ҷамъшавии ҳуҷайраҳо, бастани фаъолияти нафаскашӣ, қатъ кардани интиқоли импулсҳои асаб ва ғайра амал кунанд.47 Муайян карда шуд, ки Temephos-и органикӣ бо арзиши LC50 0.43 ppm баландтарин фаъолияти кирминацидӣ дорад, ки бо маълумоти Лек - Utala48 мувофиқ аст. Фаъолияти калонсолони малатиони органикӣ фосфори синтетикӣ дар 5.44 ppm гузориш дода шудааст. Гарчанде ки ин ду органофосфат бар зидди штаммҳои лаборатории Aedes aegypti вокунишҳои мусбат нишон додаанд, дар қисматҳои гуногуни ҷаҳон муқовимати пашша ба ин пайвастагиҳо гузориш шудааст49. Аммо, ягон гузориши шабеҳ дар бораи рушди муқовимат ба доруҳои гиёҳӣ пайдо нашудааст50. Ҳамин тариқ, растаниҳои ботаникӣ ҳамчун алтернативаҳои эҳтимолӣ ба пеститсидҳои кимиёвӣ дар барномаҳои мубориза бо векторҳо баррасӣ мешаванд.
Таъсири кирмина дар 28 комбинатсияи дуӣ (1:1), ки аз терпеноидҳои пурқувват ва терпеноидҳо бо тиметфос омода карда шудаанд, санҷида шуд ва 9 комбинатсия синергетикӣ, 14 антагонистӣ ва 5 антагонистӣ буданд. Таъсир надошт. Аз тарафи дигар, дар биоанализи потенсиали калонсолон, 7 комбинатсия синергетикӣ, 15 комбинатсия антагонистӣ ва 6 комбинатсия гузориш дода шуд, ки таъсир надоранд. Сабаби ба вуҷуд овардани таъсири синергетикии баъзе комбинатсияҳо метавонад аз он бошад, ки пайвастагиҳои номзад ҳамзамон дар роҳҳои гуногуни муҳим ё боздории пайдарпайи ферментҳои калидии гуногуни роҳи мушаххаси биологӣ ҳамкорӣ мекунанд51. Муайян карда шуд, ки якҷояшавии лимонен бо диалил дисульфид, эвкалипт ё эвгенол ҳам дар татбиқи хурд ва ҳам дар миқёси калон синергетикӣ аст (Ҷадвали 6), дар ҳоле ки якҷояшавии он бо эвкалипт ё α-пинен ба кирминаҳо таъсири антагонистӣ дорад. Ба ҳисоби миёна, лимонен синергисти хуб ба назар мерасад, ки эҳтимолан аз сабаби мавҷудияти гурӯҳҳои метил, воридшавии хуб ба қабати мушоҳада ва механизми дигари таъсир52,53. Қаблан гузориш шуда буд, ки лимонен метавонад тавассути ворид шудан ба кутикулаҳои ҳашарот (заҳролудии тамосӣ), таъсир ба системаи ҳозима (зиддифидант) ё таъсир ба системаи нафаскашӣ (фаъолияти фумигатсионӣ) таъсири заҳролуд ба вуҷуд орад,54 дар ҳоле ки фенилпропаноидҳо ба монанди эвгенол метавонанд ба ферментҳои мубодилаи моддаҳо 55 таъсир расонанд. Аз ин рӯ, омезиши пайвастагиҳо бо механизмҳои гуногуни таъсир метавонад таъсири умумии марговари омехтаро афзоиш диҳад. Эвкалиптол бо диалил дисульфид, эвкалипт ё α-пинен синергистӣ будааст, аммо омезиши дигар бо дигар пайвастагиҳо ё ғайриларвицидӣ ё антагонистӣ буданд. Тадқиқотҳои аввалия нишон доданд, ки эвкалиптол фаъолияти боздоранда ба ацетилхолинэстераза (AChE), инчунин ретсепторҳои октаамин ва GABA56 дорад. Азбаски монотерпенҳои даврӣ, эвкалиптол, эвгенол ва ғайра метавонанд механизми амалро ба фаъолияти нейротоксикии онҳо монанд дошта бошанд, 57 бо ин васила таъсири муштараки онҳоро тавассути боздории мутақобила ба ҳадди ақалл мерасонанд. Ба ҳамин монанд, омезиши Темефос бо диалил дисульфид, α-пинен ва лимонен синергетикӣ буданаш маълум шуд, ки гузоришҳои қаблиро дар бораи таъсири синергетикӣ байни маҳсулоти гиёҳӣ ва органофосфатҳои синтетикӣ тасдиқ мекунад58.
Муайян карда шуд, ки омезиши эудесмол ва эвкалиптол ба марҳилаҳои кирминавӣ ва калонсоли Aedes aegypti таъсири синергетикӣ дорад, ки эҳтимолан аз сабаби усулҳои гуногуни амали онҳо аз сабаби сохторҳои гуногуни химиявии онҳо мебошад. Эудесмол (сесквитерпен) метавонад ба системаи нафаскашӣ 59 ва эвкалиптол (монотерпен) метавонад ба ацетилхолинэстераза 60 таъсир расонад. Таъсири якҷояи компонентҳо ба ду ё зиёда маконҳои мақсаднок метавонад таъсири умумии марговари ин омезишро афзоиш диҳад. Дар биоанализҳои моддаҳои калонсолон, маълум шуд, ки малатион бо карвон ё эвкалиптол ё эвкалиптол ё диалил дисульфид ё α-пинен синергетикӣ аст, ки нишон медиҳад, ки он бо илова кардани лимонен ва ди синергетикӣ аст. Номзадҳои хуби аллерсидҳои синергетикӣ барои тамоми портфели пайвастагиҳои терпен, ба истиснои аллил трисульфид. Тангам ва Катиресан61 инчунин натиҷаҳои шабеҳи таъсири синергетикии малатион бо экстрактҳои гиёҳӣ гузориш доданд. Ин вокуниши синергетикӣ метавонад аз таъсири якҷояи заҳролудии малатион ва фитохимиявӣ ба ферментҳои безараргардонии ҳашарот вобаста бошад. Органофосфатҳо ба монанди малатион одатан тавассути боздории эстеразаҳои цитохроми P450 ва монооксигеназаҳо62,63,64 амал мекунанд. Аз ин рӯ, якҷоя кардани малатион бо ин механизмҳои амал ва терпенҳо бо механизмҳои гуногуни амал метавонад таъсири умумии марговарро ба пашшаҳо афзоиш диҳад.
Аз тарафи дигар, антагонизм нишон медиҳад, ки пайвастагиҳои интихобшуда дар якҷоягӣ нисбат ба ҳар як пайвастагии алоҳида камтар фаъоланд. Сабаби антагонизм дар баъзе комбинатсияҳо метавонад дар он бошад, ки як пайвастагӣ рафтори пайвастагии дигарро бо тағир додани суръати ҷаббида, тақсимот, мубодилаи моддаҳо ё ихроҷ тағйир медиҳад. Муҳаққиқони аввал инро сабаби антагонизм дар комбинатсияҳои доруворӣ меҳисобиданд. Молекулаҳо Механизми имконпазир 65. Ба ҳамин монанд, сабабҳои эҳтимолии антагонизм метавонанд бо механизмҳои шабеҳи амал, рақобати пайвастагиҳои таркибӣ барои ҳамон як ретсептор ё макони мақсаднок алоқаманд бошанд. Дар баъзе ҳолатҳо, боздории ғайрирақобатпазири сафедаи мақсаднок низ метавонад ба амал ояд. Дар ин таҳқиқот, ду пайвастагии органосульфур, диалил дисульфид ва диалил трисульфид, таъсири антагонистӣ нишон доданд, ки эҳтимолан аз сабаби рақобат барои ҳамон макони мақсаднок аст. Ба ҳамин монанд, ин ду пайвастагии сулфур таъсири антагонистӣ нишон доданд ва ҳангоми якҷоя бо эудесмол ва α-пинен ягон таъсир надоштанд. Эудесмол ва алфа-пинен табиатан даврӣ мебошанд, дар ҳоле ки диалил дисульфид ва диалил трисульфид табиатан алифатӣ мебошанд. Бар асоси сохтори кимиёвӣ, омезиши ин пайвастагиҳо бояд фаъолияти умумии марговарро афзоиш диҳад, зеро маконҳои ҳадафи онҳо одатан гуногунанд34,47, аммо мо дар таҷриба антагонизмро пайдо кардем, ки метавонад аз нақши ин пайвастагиҳо дар баъзе организмҳои номаълум дар системаҳои in vivo дар натиҷаи таъсири мутақобила вобаста бошад. Ба ҳамин монанд, омезиши цинол ва α-пинен вокунишҳои антагонистиро ба вуҷуд овард, гарчанде ки муҳаққиқон қаблан гузориш дода буданд, ки ин ду пайвастагӣ ҳадафҳои гуногуни амал доранд47,60. Азбаски ҳарду пайвастагиҳо монотерпенҳои даврӣ мебошанд, метавонанд баъзе маконҳои ҳадафи умумӣ вуҷуд дошта бошанд, ки метавонанд барои пайвастшавӣ рақобат кунанд ва ба заҳролудшавии умумии ҷуфтҳои комбинатории омӯхташуда таъсир расонанд.
Бар асоси арзишҳои LC50 ва фавти мушоҳидашуда, ду комбинатсияи беҳтарини синергетикии терпенҳо интихоб карда шуданд, яъне ҷуфтҳои карвон + лимонен ва эвкалиптол + эудесмол, инчунин малатиони органикии синтетикӣ бо терпенҳо. Комбинатсияи оптималии синергетикии пайвастагиҳои малатион + эудесмол дар биоанализи ҳашароти калонсолон санҷида шуд. Барои тасдиқи он, ки оё ин комбинатсияҳои муассир метавонанд бар зидди шумораи зиёди афрод дар фазоҳои нисбатан калони экспозиция кор кунанд, колонияҳои калони ҳашаротро ҳадаф қарор диҳед. Ҳамаи ин комбинатсияҳо таъсири синергетикиро бар зидди тӯдаҳои калони ҳашарот нишон медиҳанд. Натиҷаҳои монанд барои комбинатсияи оптималии синергетикии ларвисидӣ, ки бар зидди популятсияҳои калони кирминаҳои Aedes aegypti санҷида шудааст, ба даст оварда шуданд. Ҳамин тариқ, метавон гуфт, ки комбинатсияи муассири синергетикии ларвисидӣ ва калонсолонии пайвастагиҳои EO-и растанӣ номзади қавӣ бар зидди кимиёвии синтетикии мавҷуда аст ва минбаъд метавонад барои назорат кардани популятсияҳои Aedes aegypti истифода шавад. Ба ҳамин монанд, омезиши муассири ларвисидҳои синтетикӣ ё калонсолон бо терпенҳо инчунин метавонад барои кам кардани миқдори тиметфос ё малатион, ки ба пашшаҳо дода мешавад, истифода шавад. Ин омезиши пуриқтидори синергетикӣ метавонад барои таҳқиқоти оянда оид ба эволютсияи муқовимат ба дору дар пашшаҳои Aedes роҳи ҳал фароҳам оварад.
Тухмҳои Aedes aegypti аз Маркази тадқиқоти тиббии минтақавӣ, Дибругарҳ, Шӯрои тадқиқоти тиббии Ҳиндустон ҷамъоварӣ карда шуданд ва дар зери ҳарорати назоратшаванда (28 ± 1 °C) ва намӣ (85 ± 5%) дар кафедраи зоологияи Донишгоҳи Гауҳатӣ бо шароити зерин нигоҳ дошта шуданд: Ариволӣ ва дигарон тавсиф карда шуданд. Пас аз тухмгузорӣ, кирминаҳо бо хӯроки кирминаҳо (хокаи печеньеи саг ва хамиртуруш бо таносуби 3:1) ва ба калонсолон бо маҳлули 10% глюкоза дода шуданд. Аз рӯзи 3-юми пас аз пайдоиш сар карда, ба пашшаҳои модаи болиғ иҷозат дода шуд, ки хуни каламушҳои албиноро маканд. Коғази филтрро дар об дар як стакан тар кунед ва онро дар қафаси тухмгузор ҷойгир кунед.
Намунаҳои растаниҳои интихобшуда, аз ҷумла баргҳои эвкалипт (Myrtaceae), райҳони муқаддас (Lamiaceae), пудинагӣ (Lamiaceae), мелалеука (Myrtaceae) ва пиёзчаҳои аллиум (Amaryllidaceae). Аз Гуваҳатӣ ҷамъоварӣ ва аз ҷониби кафедраи ботаникаи Донишгоҳи Гауҳатӣ муайян карда шудааст. Намунаҳои растаниҳои ҷамъовардашуда (500 г) бо истифода аз дастгоҳи Клевенҷер ба муддати 6 соат ба гидродистилятсия дучор карда шуданд. EO-и истихроҷшуда дар флаконҳои шишагии тоза ҷамъоварӣ карда шуд ва барои таҳқиқоти минбаъда дар ҳарорати 4°C нигоҳ дошта шуд.
Заҳролудшавии кирмина бо истифода аз расмиёти стандартии каме тағйирёфтаи Созмони Ҷаҳонии Тандурустӣ 67 омӯхта шуд. DMSO-ро ҳамчун эмульгатор истифода баред. Ҳар як консентратсияи EO дар аввал бо 100 ва 1000 ppm санҷида шуд ва дар ҳар як такрор 20 кирмина фош карда шуд. Дар асоси натиҷаҳо, диапазони консентратсия татбиқ карда шуд ва фавт аз 1 соат то 6 соат (бо фосилаи 1 соат) ва дар 24 соат, 48 соат ва 72 соат пас аз табобат сабт карда шуд. Консентратсияҳои зерлеталӣ (LC50) пас аз 24, 48 ва 72 соати таъсири он муайян карда шуданд. Ҳар як консентратсия се маротиба дар якҷоягӣ бо як назорати манфӣ (танҳо об) ва як назорати мусбат (оби бо DMSO коркардшуда) санҷида шуд. Агар лӯхтакшавӣ ба амал ояд ва зиёда аз 10% кирминаҳои гурӯҳи назоратӣ бимиранд, таҷриба такрор карда мешавад. Агар сатҳи фавт дар гурӯҳи назоратӣ аз 5-10% зиёд бошад, формулаи ислоҳи Abbott 68-ро истифода баред.
Усули тавсифкардаи Рамар ва ҳамкоронаш 69 барои биоанализи калонсолон бар зидди Aedes aegypti бо истифода аз ацетон ҳамчун ҳалкунанда истифода шуд. Ҳар як EO аввал бар зидди пашшаҳои калонсоли Aedes aegypti бо консентратсияҳои 100 ва 1000 ppm санҷида шуд. 2 мл аз ҳар як маҳлули омодашударо ба рақами Ватман молед. 1 дона коғази филтрӣ (андозаи 12 x 15 см2) ва бигзор ацетон барои 10 дақиқа бухор шавад. Коғази филтрӣ, ки бо танҳо 2 мл ацетон коркард шудааст, ҳамчун назорати истифода шуд. Пас аз бухор шудани ацетон, коғази филтри коркардшуда ва коғази филтри назоратӣ дар найчаи силиндрӣ (10 см чуқурӣ) ҷойгир карда мешаванд. Даҳ пашшаи 3 то 4-рӯзаи ғайрихунхӯрда ба сегонаи ҳар як консентратсия интиқол дода шуданд. Дар асоси натиҷаҳои санҷишҳои пешакӣ, консентратсияҳои гуногуни равғанҳои интихобшуда санҷида шуданд. Фавт дар 1 соат, 2 соат, 3 соат, 4 соат, 5 соат, 6 соат, 24 соат, 48 соат ва 72 соат пас аз раҳо кардани магас сабт шудааст. Арзишҳои LC50-ро барои вақтҳои таъсиррасонӣ ба 24 соат, 48 соат ва 72 соат ҳисоб кунед. Агар сатҳи фавт дар гурӯҳи назоратӣ аз 20% зиёд бошад, тамоми санҷишро такрор кунед. Ба ҳамин монанд, агар сатҳи фавт дар гурӯҳи назоратӣ аз 5% зиёд бошад, натиҷаҳоро барои намунаҳои коркардшуда бо истифода аз формулаи Абботт68 танзим кунед.
Барои таҳлили пайвастагиҳои таркибии равғанҳои эфирии интихобшуда хроматографияи газӣ (Agilent 7890A) ва спектрометрияи массавӣ (Accu TOF GCv, Jeol) анҷом дода шуданд. GC бо детектори FID ва сутуни капиллярӣ (HP5-MS) муҷаҳҳаз буд. Гази интиқолдиҳанда гелий буд ва суръати ҷараён 1 мл/дақ буд. Барномаи GC ранги Allium sativum-ро ба 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M ва ранги Ocimum Sainttum-ро ба 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, барои наъно 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, барои эвкалипт 20.60-1M-10-200-3M-30-280 ва барои ранги сурхро ба 10 муқаррар мекунад. Барои ҳазор қабат ранги онҳо 10 аст: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Пайвастагиҳои асосии ҳар як EO дар асоси фоизи масоҳат, ки аз хроматограммаи GC ва натиҷаҳои спектрометрияи массавӣ (бо истинод ба пойгоҳи додаҳои стандартҳои NIST 70) ҳисоб карда шудааст, муайян карда шуданд.
Ду пайвастагии асосӣ дар ҳар як EO дар асоси натиҷаҳои GC-MS интихоб карда шуданд ва барои биоозмоишҳои минбаъда аз Sigma-Aldrich бо тозагии 98-99% харидорӣ карда шуданд. Таркибҳо аз ҷиҳати самаранокии кирмина ва калонсолон бар зидди Aedes aegypti, тавре ки дар боло тавсиф шудааст, санҷида шуданд. Тамефосати ларвисидҳои синтетикии маъмултарин (Sigma Aldrich) ва доруи малатиони калонсолон (Sigma Aldrich) барои муқоисаи самаранокии онҳо бо пайвастагиҳои интихобшудаи EO, бо риояи ҳамон тартиб, таҳлил карда шуданд.
Омехтаҳои дуӣ аз пайвастагиҳои терпени интихобшуда ва пайвастагиҳои терпенӣ бо фосфатҳои органикии тиҷоратӣ (тилефос ва малатион) бо роҳи омехта кардани вояи LC50-и ҳар як пайвастагии номзад бо таносуби 1:1 омода карда шуданд. Омехтаҳои тайёршуда дар марҳилаҳои кирминавӣ ва болиғи Aedes aegypti, тавре ки дар боло тавсиф шудааст, санҷида шуданд. Ҳар як биоанализ барои ҳар як омезиш се маротиба ва барои пайвастагиҳои алоҳидае, ки дар ҳар як омезиш мавҷуданд, се маротиба гузаронида шуд. Марги ҳашароти мақсаднок пас аз 24 соат сабт карда шуд. Сатҳи фавти пешбинишударо барои омехтаи дуӣ бо истифода аз формулаи зерин ҳисоб кунед.
ки дар он E = сатҳи пешбинишудаи фавти пашшаҳои Aedes aegypti дар посух ба омезиши дуӣ, яъне пайвастшавӣ (A + B).
Таъсири ҳар як омехтаи дуӣ ҳамчун синергетикӣ, антагонистӣ ё бе таъсир нишон дода шуд, ки бар асоси арзиши χ2, ки бо усули тавсифкардаи Pavla52 ҳисоб карда шудааст, асос ёфтааст. Арзиши χ2-ро барои ҳар як комбинатсия бо истифода аз формулаи зерин ҳисоб кунед.
Таъсири омезиш ҳамчун синергетикӣ муайян карда шуд, вақте ки арзиши ҳисобшудаи χ2 аз арзиши ҷадвал барои дараҷаҳои мувофиқи озодӣ (фосилаи эътимод 95%) зиёдтар буд ва агар фавти мушоҳидашуда аз фавти пешбинишуда зиёдтар бошад. Ба ҳамин монанд, агар арзиши ҳисобшудаи χ2 барои ҳар як омезиш аз арзиши ҷадвал бо баъзе дараҷаҳои озодӣ зиёдтар бошад, аммо фавти мушоҳидашуда аз фавти пешбинишуда пасттар бошад, табобат антагонистӣ ҳисобида мешавад. Ва агар дар ҳар як омезиш арзиши ҳисобшудаи χ2 аз арзиши ҷадвал дар дараҷаҳои мувофиқи озодӣ камтар бошад, омезиш ҳеҷ таъсире надорад.
Барои санҷиш бар зидди шумораи зиёди ҳашарот аз се то чор комбинатсияи эҳтимолан синергетикӣ (100 кирмина ва 50 фаъолияти кирминакушӣ ва ҳашароти калонсол) интихоб карда шуданд. Калонсолон) тавре ки дар боло зикр шудааст, амал мекунанд. Дар баробари омехтаҳо, пайвастагиҳои алоҳидае, ки дар омехтаҳои интихобшуда мавҷуданд, инчунин дар шумораи баробари кирминаҳои Aedes aegypti ва калонсолон санҷида шуданд. Таносуби омехта як қисми вояи LC50-и як пайвастагии номзад ва як қисми вояи LC50-и пайвастагии дигари таркибӣ мебошад. Дар биоанализи фаъолияти калонсолон, пайвастагиҳои интихобшуда дар ацетони ҳалкунанда ҳал карда шуда, ба коғази филтрӣ, ки дар зарфи пластикии силиндрии 1300 см3 печонида шуда буд, молида шуданд. Ацетон барои 10 дақиқа бухор карда шуд ва калонсолон раҳо карда шуданд. Ба ҳамин монанд, дар биоанализи кирминакушӣ, вояҳои пайвастагиҳои номзади LC50 аввал дар ҳаҷми баробари DMSO ҳал карда шуданд ва сипас бо 1 литр оби дар зарфҳои пластикии 1300 см3 нигоҳдошташуда омехта карда шуданд ва кирминаҳо раҳо карда шуданд.
Таҳлили эҳтимолияти 71 маълумоти сабтшудаи фавт бо истифода аз SPSS (версияи 16) ва нармафзори Minitab барои ҳисоб кардани арзишҳои LC50 анҷом дода шуд.
Вақти нашр: 01 июли соли 2024