Ташаккур ба шумо барои боздид аз Nature.com.Версияи браузере, ки шумо истифода мебаред, дастгирии маҳдуди CSS дорад.Барои натиҷаҳои беҳтарин, мо тавсия медиҳем, ки версияи навтари браузери худро истифода баред (ё Ҳолати мутобиқатро дар Internet Explorer ғайрифаъол кунед).Дар ҳамин ҳол, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услуб ё JavaScript намоиш медиҳем.
Фунгисидҳо аксар вақт ҳангоми гул кардани меваҳои дарахт истифода мешаванд ва метавонанд ба гардолудкунандагони ҳашарот таҳдид кунанд.Бо вуҷуди ин, дар бораи он, ки гардолудкунандаҳои занбӯри асал (масалан, занбӯрҳои яккаса, cornifrons Osmia) ба фунгисидҳои тамос ва системавӣ, ки одатан дар себ ҳангоми гулкунӣ истифода мешаванд, чӣ гуна ҷавоб медиҳанд, кам маълум аст.Ин холигии дониш қарорҳои танзимкунандаро, ки консентратсияи бехатар ва вақти пошидани фунгисидро муайян мекунад, маҳдуд мекунад.Мо таъсири ду фунгисидҳои тамос (каптан ва манкозеб) ва чаҳор фунгисидҳои байниқабатӣ/фитосистемаро (ципроциклин, миклобутанил, пиростробин ва трифоксистробин) арзёбӣ кардем.Таъсир ба афзоиши вазни кирмҳо, зинда мондан, таносуби ҷинс ва гуногунии бактерияҳо.Арзёбӣ бо истифода аз биоанализи музмини шифоҳӣ гузаронида шуд, ки дар он гардолуд дар се вояи дар асоси вояи тавсияшуда барои истифодаи саҳро (1X), нисфи вояи (0,5X) ва вояи паст (0,1X) коркард карда шуд.Ҳама вояи манкозеб ва пиритизолин вазни бадан ва зинда мондани кирминаҳоро хеле кам карданд.Сипас, мо гени 16S-ро барои тавсифи бактерияи кирми манкозеб, фунгисид, ки барои фавти баландтарин масъул аст, тартиб додем.Мо дарёфтем, ки гуногунрангии бактериявӣ ва фаровонӣ дар Тухмиҳое, ки аз гардолудҳои бо манкозеб коркардшуда ғизо мегиранд, ба таври назаррас коҳиш ёфтааст.Натичахои лабораторияи мо нишон медиханд, ки дар вакти гулкунй пошидани як кисми ин фунгицидхо махсусан ба саломатии чуворимакка зарар дорад.Ин маълумот барои қабули қарорҳои ояндаи идоракунӣ оид ба истифодаи устувори маҳсулоти ҳифзи дарахтони меваҷот муҳим аст ва ҳамчун асос барои равандҳои танзимкунанда, ки ба ҳифзи гардолудкунандагон нигаронида шудааст, хизмат мекунад.
Занбӯри яккасаи масон Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) дар охири солҳои 1970-ум ва аввали солҳои 1980-ум аз Ҷопон ба Иёлоти Муттаҳида ворид карда шуд ва аз он вақт инҷониб намуд дар экосистемаҳои идорашаванда нақши муҳими гардолудкунанда бозид.Популяцияҳои табиии ин занбӯр як қисми тақрибан 50 намуди занбӯри ваҳшӣ мебошанд, ки занбӯри асалро, ки боғҳои бодом ва себро дар Иёлоти Муттаҳида гардолуд мекунанд, пурра мекунанд2,3.Занбурҳои Мейсон бо мушкилоти зиёд рӯ ба рӯ мешаванд, аз ҷумла тақсимоти муҳити зист, патогенҳо ва пестисидҳо3,4.Дар байни инсектисидҳо, фунгисидҳо афзоиши энергия, ғизохӯрӣ5 ва кондитсионерии баданро6,7 кам мекунанд.Гарчанде ки тадқиқоти охирин нишон медиҳад, ки саломатии занбӯри Мейсон мустақиман аз микроорганизмҳои комменсалӣ ва эктобактикӣ таъсир мерасонад, 8,9, 8,9 зеро бактерияҳо ва занбӯруғҳо метавонанд ба ғизо ва аксуламали иммунӣ таъсир расонанд, таъсири таъсири фунгисидҳо ба гуногунии микробҳои занбӯри Мейсон танҳо оғоз мешавад. омӯхтааст.
Доруҳои фунгисидҳои таъсироти гуногун (контактӣ ва системавӣ) дар боғҳо пеш аз гулкунӣ ва ҳангоми гулкунӣ барои табобати бемориҳое, аз қабили пӯсти себ, пӯсидаи талх, пӯси қаҳваранг ва хокаи хокӣ пошида мешаванд10,11.Фунгисидҳо барои гардолудкунандагон безарар ҳисобида мешаванд, бинобар ин онҳо дар давраи гулкунӣ ба боғдорон тавсия дода мешаванд;Таъсир ва воридшавии ин фунгисидҳо аз ҷониби занбӯрҳо нисбатан хуб маълум аст, зеро он як қисми раванди бақайдгирии пестисидҳо аз ҷониби Агентии ҳифзи муҳити зисти ИМА ва бисёр дигар агентиҳои миллии танзимкунанда мебошад12,13,14.Бо вуҷуди ин, таъсири фунгисидҳо ба занбӯри асал камтар маълум аст, зеро онҳо тибқи созишномаҳои иҷозати маркетинг дар Иёлоти Муттаҳида талаб карда намешаванд15.Илова бар ин, умуман протоколҳои стандартишудаи озмоиши занбӯри асал вуҷуд надоранд16,17 ва нигоҳдории колонияҳое, ки занбӯри асалро барои озмоиш таъмин мекунанд, мушкил аст18.Озмоишҳои занбурҳои гуногуни идорашаванда дар Аврупо ва ИМА барои омӯзиши таъсири пеститсидҳо ба занбӯри ваҳшӣ бештар гузаронида мешаванд ва ба наздикӣ протоколҳои стандартӣ барои O. cornifrons19 таҳия карда шуданд.
Занбурҳои шохдор моноситҳо мебошанд ва ба таври тиҷоратӣ дар зироатҳои карп ҳамчун илова ё ивазкунандаи занбӯри асал истифода мешаванд.Ин занбурҳо аз моҳи март то апрел ба вуҷуд меоянд ва наринаҳои бармаҳал се-чор рӯз пеш аз модарон пайдо мешаванд.Пас аз ҷуфтшавӣ, мода фаъолона гардолуд ва гарди ҷамъоварӣ мекунад, то як қатор ҳуҷайраҳои чӯҷаҳоро дар дохили лонаҳои қубурӣ таъмин кунад (табиӣ ё сунъӣ)1,20.Тухмҳо дар болои гардолуд дар дохили ҳуҷайраҳо гузошта мешаванд;баъд мода пеш аз тайёр кардани ҳуҷайраи навбатӣ девори гилин месозад.Тухми давраи аввал дар хорион иҳота шуда, бо моеъҳои ҷанин ғизо мегиранд.Аз давраи дуюм то панҷум (препупа) кирмҳо бо гардолудшавӣ ғизо мегиранд22.Вақте ки захираи гардолуд пурра тамом мешавад, кирмчаҳо пилла ташкил карда, луғча мешаванд ва ҳамчун калонсолон дар як ҳуҷраи чӯҷаҳо, одатан дар охири тобистон пайдо мешаванд20,23.Калонсолон баҳори оянда пайдо мешаванд.Зиндагии калонсолон бо афзоиши софи энергия (афзоиши вазн) дар асоси истеъмоли ғизо алоқаманд аст.Ҳамин тариқ, сифати ғизоии гардолудшуда, инчунин омилҳои дигар, аз қабили обу ҳаво ё таъсири пеститсидҳо, муайянкунандаи зинда мондан ва саломатӣ мебошанд24.
Инсектисидҳо ва фунгисидҳое, ки пеш аз гул истифода мешаванд, метавонанд дар дохили рагҳои растанӣ ба дараҷаҳои гуногун ҳаракат кунанд, аз трансламинарӣ (масалан, аз сатҳи болоии баргҳо ба сатҳи поёнӣ, ба монанди баъзе фунгисидҳо ҳаракат кунанд) 25 то таъсироти воқеан системавӣ., ки аз реша ба тоҷ даромада метавонад, ба гарди гули себ даромада метавонад26, ки дар он ҷо O. cornifrons-ро кушта метавонанд27.Баъзе пестисидҳо инчунин ба гардолуд дохил шуда, ба инкишофи кирми ҷуворимакка таъсир мерасонанд ва боиси марги онҳо мегарданд19.Тадқиқотҳои дигар нишон доданд, ки баъзе фунгисидҳо метавонанд рафтори лонагузории намудҳои вобастаи O. lignaria28-ро ба таври назаррас тағйир диҳанд.Илова бар ин, тадқиқотҳои лабораторӣ ва саҳроӣ, ки сенарияҳои таъсири пестисидҳоро тақлид мекунанд (аз ҷумла фунгисидҳо) нишон доданд, ки пеститсидҳо ба физиология 22 морфология 29 ва зинда мондани занбӯри асал ва баъзе занбӯри асал таъсири манфӣ мерасонанд.Доруҳои гуногуни фунгицидӣ, ки мустақиман ба гулҳои кушод ҳангоми гулкунӣ андохта мешаванд, метавонанд гардеро, ки калонсолон барои рушди кирмчин ҷамъоварӣ кардаанд, олуда созанд, ки таъсири онҳо ҳанӯз мавриди омӯзиш қарор дорад30.
Бештар эътироф карда мешавад, ки ба рушди кирмҳо аз ҷониби ҷамоатҳои гардолуд ва микробҳои системаи ҳозима таъсир мерасонанд.Микробиомаи занбӯри асал ба параметрҳо ба монанди массаи бадан31, тағйироти метаболикӣ22 ва ҳассосият ба микроорганизмҳо32 таъсир мерасонад.Тадқиқотҳои қаблӣ таъсири марҳилаи рушд, маводи ғизоӣ ва муҳити зистро ба микробиомаи занбӯри якка тафтиш карданд.Ин таҳқиқот шабоҳатҳоро дар сохтор ва фаровонии микробиомаҳои кирмина ва гардолудҳо33, инчунин маъмултарин насли бактериявии Pseudomonas ва Delftia, дар байни навъҳои занбӯри яккаса ошкор карданд.Бо вуҷуди ин, гарчанде ки фунгисидҳо бо стратегияҳои ҳифзи саломатии занбӯри асал алоқаманданд, таъсири фунгисидҳо ба микробиотаи кирмҳо тавассути таъсири бевоситаи даҳонӣ омӯхта нашудааст.
Ин тадқиқот таъсири вояи воқеии шаш фунгисидҳои маъмулан истифодашавандаро, ки барои истифода дар меваҳои дарахтон дар Иёлоти Муттаҳида ба қайд гирифта шудаанд, санҷидааст, аз ҷумла фунгисидҳои тамос ва системавӣ, ки ба таври даҳонӣ ба кирми паря кирми ҷуворимакка аз ғизои ифлосшуда ворид карда мешаванд.Мо дарёфтем, ки фунгисидҳои тамос ва системавӣ афзоиши вазни бадани занбӯри асалро коҳиш дода, фавтро зиёд карданд, ки таъсири сахттарин бо манкозеб ва пиритиопид алоқаманд аст.Пас аз он мо гуногунии микробҳои Тухмиҳоеро, ки дар парҳези гардолудшуда бо манкозеб ғизо дода шудаанд, бо онҳое, ки дар парҳези назоратӣ ғизо мегиранд, муқоиса кардем.Мо механизмҳои эҳтимолии асоси фавт ва оқибатҳои барномаҳои мубориза бо ҳашароти зараррасон ва гардолудкунандагонро (IPPM)36 муҳокима мекунем.
Корнифрони калонсолони O., ки дар пилла зимистонгузаронӣ мекунанд, аз Маркази тадқиқотии меваҷот, Биглервилл, PA гирифта шуда, дар -3 то 2°C (±0,3°C) нигоҳ дошта шуданд.Пеш аз тачриба (чамъ 600 пилла).Дар моҳи майи соли 2022, ҳамарӯза 100 дона пиллаи O. cornifrons ба пиёлаҳои пластикӣ (50 пилла дар як пиёла, дарозии ДИ 5 см × 15 см) интиқол дода шуда, дар дохили пиёлаҳо барои кушодан ва таъмин кардани субстрати хоиданшаванда, кам кардани фишори сангин ҷойгир карда шуданд. занбӯри асал37.Ду пиёла пластикии дорои пилларо дар қафаси ҳашарот (30 × 30 × 30 см, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Тайван) бо ғизодиҳандаҳои 10 мл, ки дорои маҳлули 50% сахароза мебошанд, ҷойгир кунед ва барои пӯшидан ва ҷуфтшавӣ чор рӯз нигоҳ доред.23°С, намии нисбї 60%, фотопериод 10 л (шиддатнокии паст): 14 руз.100 духтар ва писарони ҷуфтшуда ҳар саҳар дар тӯли шаш рӯз (100 дар як рӯз) ба ду лонаи сунъӣ ҳангоми гули авҷи себ (лонаи дом: паҳно 33,66 × баландӣ 30,48 × дарозӣ 46,99 см; Расми иловагӣ 1) озод карда мешаванд.Дар боғи давлатии Пенсилвания, дар наздикии гелос (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), шафтолу (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), нок (Pyrus perifolia 'Pyrus 'Prusy', ҷойгир шудааст. perifolia 'Шинко', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), дарахти себи coronaria (Malus coronaria) ва навъҳои сершумори дарахтони себ (Malus coronaria, Malus), дарахти себи ватанӣ 'Co-op 30′ Enterprise™, дарахти себи Малус 'Co- Оп 31′ Winecrisp™, бегония 'Озодӣ', Бегония 'Золотой лазиз', Бегония 'Nova Spy').Ҳар як паррандахонаи пластикии кабуд дар болои ду қуттии чӯбӣ ҷойгир аст.Ҳар як қуттии лона дорои 800 найчаи коғазии холии крафт (спирали кушода, 0,8 см ID × 15 см L) (Jonesville Paper Tube Co., Мичиган) ба найҳои шаффофи селофанӣ ҷойгир карда шудааст (ниг. .
Ҳарду қуттиҳои лона ба самти шарқ рӯ ба рӯ шуда, бо панҷараҳои боғи пластикии сабз пӯшонида шуданд (модели Everbilt №889250EB12, андозаи кушодашавӣ 5 × 5 см, 0,95 м × 100 м) барои пешгирии дастрасии хояндаҳо ва паррандагон ва дар сатҳи хок дар паҳлӯи хоки қуттии лона ҷойгир карда шуданд. қуттиҳо.Қуттии лона (Расми иловагӣ 1а).Тухми чуворимакка хар руз аз лонахо 30 найча гирифта, ба лаборатория кашонда гирифта мешуд.Бо истифода аз кайчи, дар охири найча буред ва сипас найчаи спиралиро ҷудо кунед, то ҳуҷайраҳои чӯҷаҳоро фош кунед.Тухмҳои инфиродӣ ва гардолуди онҳо бо истифода аз шпатели каҷӣ (маҷмӯаи асбобҳои Microslide, BioQuip Products Inc., Калифорния) хориҷ карда шуданд.Тухмҳо дар коғази филтри намӣ инкубатсия карда шуданд ва дар зарфи Петри барои 2 соат пеш аз истифода дар таҷрибаҳои мо ҷойгир карда шуданд (Расми иловагии 1b-d).
Дар лаборатория мо заҳролудшавии даҳони шаш фунгисидҳои пеш аз шукуфтани себ ва ҳангоми шукуфтани себро дар се консентрат баҳо додем (0,1X, 0,5X ва 1X, ки дар он ҷо 1X нишона барои 100 галлон об/акр аст. Миқдори баланди саҳро = консентратсия) дар майдон)., Ҷадвали 1).Ҳар як консентрат 16 маротиба такрор карда шуд (n = 16).Ду фунгисидҳои тамос (Ҷадвали S1: mancozeb 2696,14 ppm ва каптан 2875,88 ppm) ва чор фунгисидҳои системавӣ (Ҷадвали S1: пиритиостробин 250,14 ppm; trifloxystrobin 110,06 ppm; myclobutanil 110,06 ppm; azolbutanil 28,28 ppm; ppm) заҳролудшавӣ ба меваҳо, сабзавот ва зироатҳои ороишӣ .Мо гардолудро бо ёрии суфтакунанда гомогенизатсия кардем, 0,20 г ба чоҳ (24-чоҳии Falcon Plate) интиқол додем ва 1 мкл маҳлули фунгицидро илова ва омехта кардем, то гардолудкунии пирамидаро бо чоҳҳои чуқурии 1 мм, ки дар онҳо тухм гузошта шуда буданд, ба вуҷуд овард.Бо истифода аз spatula хурд ҷойгир кунед (Расми иловагӣ 1c,d).Лавҳаҳои Falcon дар ҳарорати хонагӣ (25 ° C) ва намии нисбӣ 70% нигоҳ дошта шуданд.Мо онҳоро бо Тухми назоратӣ муқоиса кардем, ки бо ғизои якхелаи гардолудшуда, ки бо оби соф коркард шудаанд, ғизо дода шудаанд.Мо маргро ба қайд гирифтем ва вазни кирминаро ҳар рӯзи дигар чен кардем, то он даме, ки кирмҳо ба синни пеш аз пупалӣ расиданд, бо истифода аз тавозуни таҳлилӣ (Fisher Scientific, дақиқӣ = 0,0001 г).Нихоят таносуби чинс бо рохи кушодани пилла баъди 2,5 мох муайян карда шуд.
ДНК аз тамоми Тухми O. cornifrons (n = 3 дар як ҳолати табобат, гардолуд бо манкозеб коркардшуда ва коркарднашуда) истихроҷ карда шуд ва мо дар ин намунаҳо таҳлили гуногунии микробҳоро анҷом додем, хусусан аз он сабаб, ки дар манкозеб сатҳи баландтарин фавт дар кирмҳо мушоҳида шудааст.гирифтани MnZn.ДНК бо истифода аз маҷмӯаи DNA DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead (Zymo Research, Irvine, CA) пурқувват карда, тоза карда шуд ва пайдарпай (600 давра) дар Illumina® MiSeq ™ бо истифода аз маҷмӯаи v3.Пайдарпайвандии мақсадноки генҳои бактериявии рибосомаии 16S бо истифода аз маҷмӯаи Quick-16S™ NGS Library Prep (Zymo Research, Irvine, CA) бо истифода аз праймерҳое, ки ба минтақаи V3-V4-и гени 16S rRNA нигаронида шудаанд, анҷом дода шуд.Илова бар ин, пайдарпайии 18S бо истифода аз 10% дохилкунии PhiX анҷом дода шуд ва амплификация бо истифода аз ҷуфти ибтидоии 18S001 ва NS4 анҷом дода шуд.
Воридот ва коркарди хондани ҷуфтшуда39 бо истифода аз лӯлаи QIIME2 (v2022.11.1).Ин хонданҳо бурида ва якҷоя карда шуданд ва пайдарпаии химерӣ бо истифода аз плагини DADA2 дар QIIME2 (qiime dada2 pairing noise)40 хориҷ карда шуданд.Супоришҳои синфи 16S ва 18S бо истифода аз плагини таснифи объекти Classify-sklearn ва артефакти қаблан омӯзонидашудаи silva-138-99-nb-классификатор иҷро шуданд.
Ҳама маълумоти таҷрибавӣ барои муқаррарӣ (Шапиро-Вилкс) ва якхела будани дисперсияҳо (санҷиши Левен) тафтиш карда шуданд.Азбаски маҷмӯи маълумот ба фарзияҳои таҳлили параметрӣ ҷавобгӯ набуд ва трансформатсия боқимондаҳоро стандартизатсия накард, мо як ANOVA дуҷонибаи ғайрипараметриро (Крускал-Уоллис) бо ду омил [вақт (се марҳилаи 2, 5 ва 8 рӯз) анҷом додем. нуқтаҳои вақт) ва фунгисид] барои арзёбии таъсири табобат ба вазни тару тозаи кирм, пас аз он бо истифода аз санҷиши Wilcoxon муқоисаҳои дуҷонибаи ғайрипараметрӣ анҷом дода шуданд.Мо модели умумии хаттӣ (GLM) бо тақсимоти Пуассонро барои муқоисаи таъсири фунгисидҳо ба зиндамонӣ дар се консентратсияи фунгисидҳо истифода бурдем41,42.Барои таҳлили фаровонии дифференсиалӣ, шумораи вариантҳои пайдарпайии ампликонҳо (ASVs) дар сатҳи генус коҳиш ёфт.Муқоисаи фаровонии дифференсиалӣ байни гурӯҳҳо бо истифода аз фаровонии нисбии 16S (сатҳи насл) ва 18S бо истифода аз модели иловагии умумӣ барои мавқеъ, миқёс ва шакл (GAMLSS) бо тақсимоти оилавии бета-сифрӣ (BEZI), ки дар макро моделсозӣ шудаанд, анҷом дода шуданд. .дар Microbiome R43 (v1.1).1).Пеш аз таҳлили дифференсиалӣ намудҳои митохондриалӣ ва хлоропластро хориҷ кунед.Аз сабаби сатҳҳои гуногуни таксономии 18S, барои таҳлилҳои дифференсиалӣ танҳо сатҳи пасттарини ҳар як таксон истифода мешуд.Ҳама таҳлилҳои оморӣ бо истифода аз R (v. 3.4.3., лоиҳаи CRAN) анҷом дода шуданд (Дастам 2013).
Таъсири манкозеб, пиритиостробин ва трифоксистробин афзоиши вазни баданро дар cornifrons O. хеле кам кард (расми 1).Ин таъсирот барои ҳар се вояи арзёбӣшуда пайваста мушоҳида карда шуданд (расми 1a–c).Циклостробин ва миклобутанил вазни кирми кирмакро хеле кам накарданд.
Вазни миёнаи тару тозаи кирми баргҳо дар се нуқтаи вақт дар чаҳор табобати парҳезӣ чен карда шудааст (хуроки якхелаи гардолуд + фунгисид: назорат, вояи 0,1X, 0,5X ва 1X).(а) Миқдори кам (0,1X): нуқтаи аввал (рӯзи 1): χ2: 30,99, DF = 6;P <0,0001, нуқтаи дуюм (рӯзи 5): 22,83, DF = 0,0009;бори сеюм;нуқта (рӯзи 8): χ2: 28,39, DF = 6;(б) нисфи вояи (0,5X): нуқтаи аввал (рӯзи 1): χ2: 35,67, DF = 6;P <0,0001, нуқтаи дуюм (рӯзи якум).): χ2: 15,98, DF = 6;P = 0,0090;нуқтаи сеюм (рӯзи 8) χ2: 16.47, DF = 6;(в) Ҷойгиршавӣ ё вояи пурра (1X): нуқтаи аввал (рӯзи 1) χ2: 20,64, P = 6;P = 0,0326, нуқтаи дуюм (рӯзи 5): χ2: 22,83, DF = 6;P = 0,0009;нуқтаи сеюм (рӯзи 8): χ2: 28,39, DF = 6;таҳлили ғайрипараметрии дисперсия.Сутунҳо нишон медиҳанд, ки миёнаи ± SE муқоисаҳои ҷуфтӣ (α = 0,05) (n = 16) *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,001, ***P ≤ 0,0001.
Дар вояи пасттарин (0,1X) вазни бадани кирмина бо трифлоксистробин 60%, манкозеб 49%, миклобутанил 48% ва пиритистробин 46% кам шуд (расми 1а).Ҳангоми ба нисфи вояи саҳроӣ (0,5X) дучор шудан вазни бадани кирми манкозеб 86%, пиритиостробин 52% ва трифлоксистробин 50% кам шуд (расми 1б).Микдори пурраи саҳроӣ (1X) манкозеб вазни кирминаро 82%, пиритиостробинро 70% ва трифоксистробин, миклобутанил ва сангардро тақрибан 30% кам кард (расми 1в).
Миқдори фавт дар байни кирминаҳое, ки аз гардолудшуда бо манкозеб ғизо гирифтаанд, баландтарин буд ва пас аз он пиритиостробин ва трифоксистробин.Фавт бо зиёд шудани вояи манкозеб ва пиритизолин зиёд шуд (расми 2; Љадвали 2).Бо вуҷуди ин, марги ҷуворимакка танҳо каме зиёд шуд, зеро консентратсияи trifloxystrobin зиёд шуд;Ципродинил ва каптан дар муқоиса бо табобатҳои назоратӣ фавтро ба таври назаррас афзоиш надоданд.
Миқдори марги Тухми пашшаҳои буррӣ пас аз истеъмоли гардолудшудае, ки бо шаш фунгисидҳои гуногун коркард шудааст, муқоиса карда шуд.Манкозеб ва пентопирамид ба таъсири даҳонӣ ба кургҳои ҷуворимакка ҳассостар буданд (GLM: χ = 29,45, DF = 20, P = 0,0059) (хат, нишеб = 0,29, P <0,001; нишеб = 0,24, P <0,00).
Ба ҳисоби миёна, дар тамоми табобатҳо 39,05% беморон занон ва 60,95% мардон буданд.Дар байни муолиҷаҳои назоратӣ, ҳиссаи занон ҳам дар таҳқиқоти вояи кам (0,1X) ва ҳам нисфи вояи (0,5X) 40% ва дар таҳқиқоти саҳроӣ (1X) 30% буд.Дар вояи 0,1X, дар байни кирмичахои аз гардолудшуда, ки бо манкозеб ва миклобутанил табобат карда шудаанд, 33,33 фоизи калонсолон зан, 22 фоизи калонсолон зан, 44 фоизи кирми калон зан, 44 фоизи кирми калон зан буданд.зан, 41% кирми калонсол занон буданд ва назорат 31% буданд (расми 3а).Ҳангоми 0,5 маротиба зиёд кардани воя 33% кирмҳои калонсол дар гурӯҳи манкозеб ва пиритиостробин зананд, 36% дар гурӯҳи трифоксистробин, 41% дар гурӯҳи миклобутанил ва 46% дар гурӯҳи ципростробин.Ин нишондод дар гурӯҳ 53% буд.дар гурӯҳи каптан ва 38% дар гурӯҳи назорат (расми 3б).Дар вояи 1X, 30% гурӯҳи манкозеб занҳо, 36% гурӯҳи пиритиостробин, 44% гурӯҳи трифоксистробин, 38% гурӯҳи миклобутанил, 50% гурӯҳи назорат занон буданд – 38,5% (расми 3c). .
Фоизи мурғони занона ва нарина пас аз таъсири фунгисидҳо дар марҳилаи кирм.(а) Миқдори кам (0,1X).(б) нисфи вояи (0,5X).(в) Микдори саҳроӣ ё вояи пурра (1X).
Тањлили пайдарпайии 16S нишон дод, ки гурўњи бактерияњо дар байни Тухми бо љолибе, ки бо манкозеб коркард шудааст ва кирми бо љолибе, ки коркарднашуда гизо дода шудааст, тафовут дорад (расми 4а).Нишондиҳандаи микробҳои кирми коркарднашуда, ки аз гардолудшуда ғизо гирифтаанд, нисбат ба кирми бо гардолудшудаи манкозеб ғизо гирифташуда баландтар буд (расми 4б).Гарчанде ки фарқияти мушоҳидашуда дар сарватмандии байни гурӯҳҳо аз ҷиҳати оморӣ аҳамиятнок набуд, он назар ба он, ки ҳангоми ғизодиҳии кирмҳо аз гардолуди коркарднашуда мушоҳида шудааст, хеле паст буд (расми 4c).Фаровонии нисбӣ нишон дод, ки микробиотаи кирминаҳое, ки бо гардолудҳои назоратӣ ғизо мегиранд, назар ба тухми кирми бо манкозеб коркардшуда гуногунтар аст (расми 5а).Таҳлили тавсифӣ мавҷудияти 28 наслро дар намунаҳои назоратӣ ва бо манкозеб коркардшуда нишон дод (расми 5б).c Таҳлил бо истифода аз пайдарпаии 18S ҳеҷ фарқияти назаррасро ошкор накард (Расми иловагӣ 2).
Профилҳои SAV дар асоси пайдарпаии 16S бо сарвати Шеннон муқоиса карда шуданд ва сарвати дар сатҳи филум мушоҳидашуда.(a) Таҳлили асосии координатаҳо (PCoA) дар асоси сохтори умумии ҷомеаи микробҳо дар кирми аз гардолуднашуда ё назорат (кабуд) ва кирми бо манкозеб (норанҷӣ) коркардшуда.Ҳар як нуқтаи маълумот намунаи алоҳидаро ифода мекунад.PCoA бо истифода аз масофаи Брей-Кертиси тақсимоти бисёрҷонибаи t ҳисоб карда шуд.Байзавӣ сатҳи эътимоди 80% -ро нишон медиҳад.(б) Boxplot, маълумот дар бораи сарвати Шеннон (нуқтаҳо) ва в.Сарвати мушоҳидашаванда.Қуттиҳои қуттиҳо қуттиҳоро барои хати миёна, диапазони байникварталӣ (IQR) ва 1,5 × IQR (n = 3) нишон медиҳанд.
Таркиби ҷамоаҳои микробҳои Тухмиҳое, ки аз гардолудҳои бо манкозеб коркардшуда ва коркарднашуда ғизо мегиранд.$A) Миқдори нисбии наслҳои микробҳо дар кирмҳо.(б) Харитаи гармии ҷамоатҳои микробҳои муайяншуда.Delftia (таносуби эҳтимолияти (OR) = 0,67, P = 0,0030) ва Pseudomonas (OR = 0,3, P = 0,0074), Microbacterium (OR = 0,75, P = 0,0617) (OR = 1,5, P = 0,0060);Сатрҳои харитаи гармӣ бо истифода аз масофаи коррелятсия ва пайвасти миёна гурӯҳбандӣ карда мешаванд.
Натиҷаҳои мо нишон медиҳанд, ки таъсири даҳонӣ ба фунгисидҳои контактӣ (манкозеб) ва системавӣ (пиростробин ва трифлоксистробин), ки дар давраи гулкунӣ васеъ истифода мешаванд, афзоиши вазнро хеле кам карда, марги кирми ҷуворимаккаро зиёд мекунад.Илова бар ин, манкозеб гуногунрангӣ ва сарвати микробиомаро дар марҳилаи пеш аз пуппал ба таври назаррас коҳиш дод.Миклобутанил, як фунгисиди систематикӣ, афзоиши вазни бадани кирмҳоро дар ҳар се вояи ба таври назаррас коҳиш дод.Ин таъсир дар нуқтаи дуюм (рӯзи 5) ва сеюм (рӯзи 8) аён буд.Баръакси ин, кипродинил ва каптан дар муқоиса бо гурӯҳи назоратӣ афзоиши вазн ё зиндамониро ба таври назаррас коҳиш надоданд.Ба маълумоти мо, ин кор аввалин корест, ки таъсири меъёри саҳроии фунгицидҳои гуногунро, ки барои ҳифзи зироатҳои ҷуворимакка тавассути таъсири бевоситаи гардолуд истифода мешаванд, муайян мекунад.
Ҳама табобатҳои фунгисидҳо афзоиши вазни баданро нисбат ба табобатҳои назорат ба таври назаррас коҳиш доданд.Манкозеб ба афзоиши вазни бадани кирмҳо таъсири бештар расонд ва ба ҳисоби миёна 51% кам шуд, пас пиритиостробин.Бо вуҷуди ин, дигар тадқиқотҳо дар бораи таъсири манфии вояи саҳроии фунгисидҳо дар марҳилаҳои кирмҳо гузориш надодаанд44.Гарчанде ки биосидҳои дитиокарбамат заҳролудшавии кам доранд45, бисдитиокарбаматҳои этилен (EBDCS) ба монанди манкозеб метавонанд то сулфиди этилен мочевина таназзул кунанд.Бо назардошти таъсири мутагении он дар ҳайвоноти дигар, ин маҳсулоти таназзул метавонад барои таъсири мушоҳидашуда масъул бошад46,47.Тадқиқотҳои қаблӣ нишон доданд, ки ба ташаккули тиоми карбамид этилен аз омилҳое ба монанди баланд шудани ҳарорат48, сатҳи намӣ49 ва давомнокии нигоҳдории маҳсулот50 таъсир мерасонад.Шароити дурусти нигоҳдории биосидҳо метавонад ин таъсироти тарафҳоро коҳиш диҳад.Илова бар ин, Идораи Аврупо оид ба бехатарии озуқаворӣ аз заҳролудшавии пиритиопид изҳори нигаронӣ кардааст, ки он барои системаҳои ҳозимаи ҳайвоноти дигар канцерогенӣ нишон дода шудааст51.
Истифодаи даҳони манкозеб, пиритиостробин ва трифлоксистробин фавти кирми ҷуворимаккаро зиёд мекунад.Баръакси ин, миклобутанил, ципроциклин ва каптан ба фавт таъсире надоштанд.Ин натиҷаҳо аз натиҷаҳои Ladurner et al.52 фарқ мекунанд, ки нишон доданд, ки каптан зинда мондани O. lignaria ва Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae) хеле кам шудааст.Илова бар ин, фунгисидҳо, аз қабили каптан ва боскалид муайян карда шудаанд, ки боиси марги кирмҳо52,53,54 ё рафтори ғизодиҳиро тағйир медиҳанд55.Ин тағиротҳо, дар навбати худ, метавонанд ба сифати ғизоии гардолуд ва дар ниҳоят ба афзоиши энергияи марҳилаи кирмина таъсир расонанд.Сатҳи фавти дар гурӯҳи назоратӣ мушоҳидашуда бо таҳқиқоти дигар 56,57 мувофиқ буд.
Таносуби ҷинси мақбули мардонро, ки дар кори мо мушоҳида мешавад, метавон бо омилҳое, аз қабили нокифоя будани ҷуфтшавӣ ва шароити номусоиди обу ҳаво ҳангоми гулкунӣ шарҳ дод, ки қаблан барои O. cornuta Висенс ва Бош пешниҳод карда буданд.Гарчанде ки духтарон ва писарон дар таҳқиқоти мо чор рӯз барои ҷуфтшавӣ буданд (давре, ки одатан барои ҷуфткунии муваффақ кифоя ҳисобида мешавад), мо дидаву дониста шиддати рӯшноиро коҳиш додем, то стрессро кам кунад.Аммо, ин тағирот метавонад нохост ба раванди ҷуфтшавӣ халал расонад61.Илова бар ин, занбӯри асал чанд рӯз обу ҳавои номусоидро аз сар мегузаронад, аз ҷумла борон ва ҳарорати паст (<5°C), ки низ метавонад ба муваффақияти ҷуфтшавӣ таъсири манфӣ расонад4,23.
Гарчанде ки тадқиқоти мо ба тамоми микробиомаи кирмина тамаркуз карда буд, натиҷаҳои мо дар бораи муносибатҳои эҳтимолии байни ҷомеаҳои бактериявӣ, ки метавонанд барои ғизодиҳии занбӯри асал ва таъсири фунгисидҳо муҳим бошанд, фаҳмиш медиҳанд.Масалан, кирминаҳое, ки гардолудшудаи бо манкозеб коркардшуда ғизо дода шуда буданд, дар муқоиса бо кирмичаҳое, ки бо гардолудҳои коркарднашуда ғизо мегиранд, сохтор ва фаровонии микробҳоро ба таври назаррас коҳиш доданд.Дар Тухмиҳое, ки гардолудҳои коркарднашударо истеъмол мекунанд, гурӯҳҳои бактериявии Proteobacteria ва Actinobacteria бартарӣ доштанд ва асосан аэробӣ ё факултативӣ аэробӣ буданд.Бактерияҳои Делфт, ки одатан бо намудҳои занбӯри якка алоқаманданд, маълуманд, ки фаъолияти антибиотикӣ доранд, ки нақши эҳтимолии муҳофизатӣ аз патогенҳоро нишон медиҳанд.Навъи дигари бактериявӣ, Pseudomonas, дар Тухмиҳое, ки аз гардолуднашуда ғизо гирифтаанд, фаровон буд, аммо дар кирми бо манкозеб коркардшуда ба таври назаррас коҳиш ёфт.Натиҷаҳои мо таҳқиқоти қаблиро дастгирӣ мекунанд, ки Pseudomonas-ро ҳамчун яке аз наслҳои фаровон дар O. bicornis35 ва дигар арӯсҳои танҳоӣ34 муайян мекунанд.Ҳарчанд далелҳои таҷрибавӣ оид ба нақши Pseudomonas дар саломатии cornifrons O. омӯхта нашудаанд, ин бактерия барои мусоидат ба синтези токсинҳои муҳофизатӣ дар гамбӯсаки Paederus fuscipes ва мусоидат ба мубодилаи аргинин дар vitro 35, 65. Ин мушоҳидаҳо нишон медиҳанд. нақши потенсиалӣ дар муҳофизати вирусҳо ва бактерияҳо дар давраи рушди кирми O. cornifrons.Микробактерия як ҷинси дигаре аст, ки дар таҳқиқоти мо муайян карда шудааст, ки дар шумораи зиёди кирми пашшаҳои сиёҳпӯст дар шароити гуруснагӣ мавҷуд аст66.Дар Тухми O. cornifrons, микробактерияҳо метавонанд дар шароити стресс ба мувозинат ва устувории микробиомаи рӯда мусоидат кунанд.Илова бар ин, Rhodococcus дар Тухми O. cornifrons мавҷуд аст ва бо қобилияти безараргардонии худ маълум аст67.Ин ҷинс дар рӯдаи A. florea низ вомехӯрад, аммо дар миқдори хеле кам68.Натиҷаҳои мо мавҷудияти вариантҳои зиёди генетикиро дар таксонҳои сершумори микробҳо нишон медиҳанд, ки метавонанд равандҳои мубодилаи моддаҳоро дар кирмҳо тағир диҳанд.Бо вуҷуди ин, беҳтар фаҳмидани гуногунии функсионалии O. cornifrons лозим аст.
Хулоса, натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки манкозеб, пиритиостробин ва трифлоксистробин афзоиши вазни баданро коҳиш дода, марги кирми ҷуворимаккаро зиёд кардаанд.Гарчанде ки дар бораи таъсири фунгисидҳо ба гардолудкунандагон нигарониҳо зиёд шуда истодааст, зарурати беҳтар фаҳмидани таъсири метаболитҳои боқимондаи ин пайвастагиҳо вуҷуд дорад.Ин натиҷаҳоро метавон ба тавсияҳо оид ба барномаҳои идоракунии ҳамгирошудаи гардолудкунандагон дохил кард, ки ба деҳқонон дар пешгирӣ кардани истифодаи фунгисидҳои муайян пеш аз ва ҳангоми гули дарахтони мевадиҳанда тавассути интихоби фунгисидҳо ва тағир додани вақти истифода ё ташвиқи истифодаи алтернативаҳои камтар зараровар кӯмак мекунанд 36. Ин маълумот. барои таҳияи тавсияҳо муҳим аст.оид ба истифодаи пестисидҳо, ба монанди танзими барномаҳои мавҷудаи дорупошӣ ва тағир додани вақти дорупошӣ ҳангоми интихоби фунгисидҳо ё пешбурди истифодаи алтернативаҳои камтар хатарнок.Тадқиқоти минбаъда дар бораи таъсири манфии фунгисидҳо ба таносуби ҷинс, рафтори ғизо, микробиомаи рӯда ва механизмҳои молекулавии талафоти вазн ва марги ҷуворимакка зарур аст.
Маълумоти манбаъҳои 1, 2 ва 3 дар расмҳои 1 ва 2 дар анбори додаҳои figshare DOI ҷойгир карда шудаанд: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 ва https://doi.org/10.6084/m9.Figshare.24996233.Пайдарҳамии дар омӯзиши ҷорӣ таҳлилшуда (Расмҳои 4, 5) дар анбори NCBI SRA таҳти рақами пайвастшавӣ PRJNA1023565 дастрасанд.
Бош, Ҷ. ва Кемп, ВП Рушд ва таъсиси навъҳои занбӯри асал ҳамчун гардолудкунандагони зироатҳои кишоварзӣ: мисоли насли Осмия.(Hymenoptera: Megachilidae) ва дарахтони мевадор.барзагов.Ntomore.захира.92, 3–16 (2002).
Паркер, MG ва дигарон.Амалҳои гардолудкунӣ ва дарки гардолудкунандагони алтернативӣ дар байни себпарварони Ню Йорк ва Пенсилвания.навсозӣ.хочагии кишлок.системаҳои ғизо.35, 1–14 (2020).
Koch I., Lonsdorf EW, Artz DR, Pitts-Singer TL ва Ricketts TH Экология ва иқтисоди гардолудкунии бодом бо истифода аз занбурҳои ватанӣ.J. Иқтисодиёт.Ntomore.111, 16–25 (2018).
Ли, Э., Ҳе, Ю. ва Пак, Ю.-Л.Таъсири тағирёбии иқлим ба фенологияи трагопан: оқибатҳо барои идоракунии аҳолӣ.Баромадан.Тағйир 150, 305–317 (2018).
Артз, ДР ва Питтс-Сингер, TL Таъсири фунгицид ва спрейҳои адъювант ба рафтори лонагузории ду занбӯри яккасаи идорашаванда (Osmia lignaria ва Megachile rotundata).PloS One 10, e0135688 (2015).
Бове, С ва дигарон.Фунгисидҳои заҳрноки зироати пастсифат (фенбуконазол) ба сигналҳои сифати репродуктивии мардон халал мерасонанд, ки дар натиҷа муваффақияти ҷуфтшавӣ дар занбурҳои танҳоии ваҳшӣ коҳиш меёбад.J. Барномаҳо.экология.59, 1596–1607 (2022).
Sgolastra F. ва дигарон.Инсектисидҳои неоникотиноид ва биосинтези эргостерол фавти синергистии фунгисидҳоро дар се намуди занбӯри асал коҳиш медиҳанд.Муборизаи хашароти зараррасон.илм.73, 1236–1243 (2017).
Kuhneman JG, Gillung J, Van Dyck MT, Fordyce RF.ва Данфорт Б.Н. Тухми арафаи яккашакл гуногунии бактерияҳоеро, ки тавассути гардолуд ба занбӯри лонааш Osmia cornifrons (Megachilidae) таъмин мекунанд, тағир медиҳанд.пеш.микроорганизм.13, 1057626 (2023).
Dharampal PS, Danforth BN ва Steffan SA Микроорганизмҳои эктосимбиотикӣ дар гардолудшудаи ферментшуда барои рушди занбӯри занбӯри якка мисли худи гардолуд муҳиманд.экология.эволютсия.12. e8788 (2022).
Kelderer M, Manici LM, Caputo F ва Thalheimer M. Шинонидани байни қаторҳо дар боғҳои себ барои мубориза бо бемориҳои такрорӣ: омӯзиши амалии самаранокӣ дар асоси нишондиҳандаҳои микробҳо.Хоки растанӣ 357, 381–393 (2012).
Мартин П.Л., Кравчик Т., Ходадади Ф., Ачимович С.Г. ва Питер К.А. Пӯсидаи талхи себ дар миёнаи Атлантикаи Иёлоти Муттаҳида: арзёбии намудҳои сабабгор ва таъсири шароити обу ҳавои минтақавӣ ва ҳассосияти навъҳо.Фитопатология 111, 966–981 (2021).
Каллен MG, Томпсон LJ, Каролан ҶК, Stout JK.ва Стэнли DA Фунгисидҳо, гербисидҳо ва занбӯри асал: баррасии мунтазами тадқиқот ва усулҳои мавҷуда.PLoS One 14, e0225743 (2019).
Pilling, ED ва Jepson, PC Таъсири синергетикии фунгисидҳои EBI ва инсектисидҳои пиретроид ба занбӯри асал (Apis mellifera).илмро зараррасон мекунад.39, 293–297 (1993).
Mussen, EC, Lopez, JE ва Peng, CY Таъсири фунгисидҳои интихобшуда ба афзоиш ва рушди Тухми занбӯри асал Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae).Чоршанбе.Ntomore.33, 1151-1154 (2004).
Ван Дайк, М., Муллен, Э., Уикстед, Д., ва МакАрт, С. Дастури қарор оид ба истифодаи пеститсидҳо барои ҳифзи гардолудкунандагон дар боғҳои дарахтон (Донишгоҳи Корнелл, 2018).
Iwasaki, JM ва Hogendoorn, K. Таъсири занбӯри асал ба ғайрипестисидҳо: баррасии усулҳо ва натиҷаҳои гузориш.хочагии кишлок.экосистема.Чоршанбе.314, 107423 (2021).
Копит AM, Клингер Е, Кокс-Фостер ДЛ, Рамирес РА.ва Pitts-Singer TL. Таъсири намуди таъминот ва таъсири пестисидҳо ба рушди кирмаки Осмия лигнария (Hymenoptera: Megachilidae).Чоршанбе.Ntomore.51, 240–251 (2022).
Kopit AM ва Pitts-Singer TL Роҳҳои таъсири пестисидҳо ба занбурҳои лонаҳои холӣ.Чоршанбе.Ntomore.47, 499–510 (2018).
Пан, НТ ва дигарон.Протоколи нави биотаҳлил барои арзёбии заҳролудшавии пестисидҳо дар занбурҳои боғи ҷопонӣ (Osmia cornifrons).илм.Ҳисоботи 10, 9517 (2020).
Вақти фиристодан: 14 май-2024