Маводҳои растанӣ ва патогенӣ
Доктор Пэт Браун дар Донишгоҳи Иллинойс (ҳоло дар Донишгоҳи Калифорния, Дэвис) харитасозии популятсияи ассотсиатсияи соргоро пешниҳод кардааст, ки бо номи популятсияи табдили сорго (SCP) маъруф аст. Он қаблан тавсиф шуда буд ва маҷмӯаи хатҳои гуногунест, ки ба фотопериодҳо ҳассос нестанд ва қади хурдтар доранд, то афзоиш ва рушди растаниҳоро дар муҳити ИМА осон кунанд. Дар ин таҳқиқот 510 хат аз ин популятсия истифода шудааст, гарчанде ки аз сабаби нашъунамои бад ва дигар масъалаҳои назорати сифат, на ҳамаи хатҳо дар таҳлили ҳар се хусусият истифода шудаанд. Дар ниҳоят, маълумот аз 345 хат барои таҳлили вокуниши хитин, 472 хат барои вокуниши flg22 ва 456 хат барои муқовимати TLS истифода шудааст.Б. кукиштамми LSLP18 аз доктор Берт Блум дар Донишгоҳи Арканзас гирифта шудааст.
Андозагирии вокуниши MAMP
Дар ин таҳқиқот ду MAMP-и гуногун flg22 (каталоги Genscript# RP19986) ва хитин истифода шуданд. Растаниҳои сорго дар ҷойҳое, ки дар гармхона бо хок (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) пур карда шудаанд, парвариш карда шуданд. Растаниҳо як рӯз пеш аз ҷамъоварии намуна обёрӣ карда шуданд, то дар рӯзи ҷамъоварӣ нами зиёдатии баргҳо пешгирӣ карда шавад.
Хатҳо тасодуфӣ интихоб карда шуданд ва бо сабабҳои логистикӣ, дар партияҳои 60 хат шинонда шуданд. Барои ҳар як хат, се "дегча" бо ду тухмӣ дар ҳар як хат шинонда шуданд. Партияҳои баъдӣ ҳамин ки партияи қаблӣ коркард шуд, то он даме ки тамоми популятсия арзёбӣ шавад, шинонда шуданд. Барои ҳарду MAMP ду озмоиши таҷрибавӣ гузаронида шуд, ки дар ҳардуи ин ду озмоиш генотипҳо аз нав тасодуфӣ интихоб карда шуданд.
Таҳлилҳои ROS мувофиқи тавсифи қаблӣ анҷом дода шуданд. Хулоса, барои ҳар як хат шаш тухмӣ дар 3 дегчаҳои гуногун шинонда шуданд. Аз ниҳолҳои ҳосилшуда, се дона дар асоси якрангӣ интихоб карда шуданд. Ниҳолҳое, ки ғайриоддӣ ба назар мерасиданд ё аз аксарият хеле баландтар ё кӯтоҳтар буданд, истифода нашуданд. Аз қисми васеътарини барги 4-уми се растании гуногуни сорго бо диаметри 3 мм чор диски барг бурида шуданд. Як диск барои як барг аз ду растанӣ ва ду диск аз як растанӣ, ки диски дуюм назорати об мешавад (нигаред ба зер). Дискҳо алоҳида дар 50 µl H2O дар табақи сиёҳи 96-чоҳ шино карда шуданд, бо мӯҳри алюминий барои пешгирӣ аз таъсири рӯшноӣ мӯҳр карда шуданд ва дар ҳарорати хонагӣ шабона нигоҳ дошта шуданд. Субҳи рӯзи дигар маҳлули реаксия бо истифода аз 2 мг/мл зонди хемилюминесцентӣ L-012 (Wako, каталог # 120-04891), 2 мг/мл пероксидазаи хрен (навъи VI-A, Sigma-Aldrich, каталог # P6782) ва 100 мг/мл Хитин ё 2 мкМ Flg22 тайёр карда шуд. 50 мкл аз ин маҳлули реаксия ба се аз чор чоҳ илова карда шуд. Чоҳи чорум як чоҳи назоратии тақрибӣ буд, ки ба он маҳлули реаксия бидуни MAMP илова карда шуд. Дар ҳар як табақ чор чоҳи холӣ, ки танҳо об доштанд, низ дохил карда шуданд.
Пас аз илова кардани маҳлули реаксия, люминесценция бо истифода аз микропластинаи бисёрҷонибаи SynergyTM 2 (BioTek) дар ҳар 2 дақиқа барои 1 соат чен карда шуд. Хонандаи плита дар ин 1 соат дар ҳар 2 дақиқа андозагирии люминесценцияро анҷом медиҳад. Ҷамъи ҳамаи 31 хониш барои додани арзиш барои ҳар як чоҳ ҳисоб карда шуд. Арзиши тахминии вокуниши MAMP барои ҳар як генотип ҳамчун (арзиши миёнаи люминесценцияи се чоҳи таҷрибавӣ - арзиши чоҳи тақлидӣ) - бо тарҳи арзиши миёнаи чоҳи холӣ ҳисоб карда шуд. Арзишҳои чоҳи холӣ пайваста ба сифр наздик буданд.
Дискҳои барг азНикотиана бентамиёна, як хати сорго бо суръати баланд (SC0003) ва як хати сорго бо суръати паст (PI 6069) низ ҳамчун назорат дар ҳар як лавҳаи 96-чоҳӣ барои мақсадҳои назорати сифат дохил карда шуданд.
Б. кукиомодасозии эмгузаронӣ ва эмгузаронӣ
Б. кукиПайванд мувофиқи тавсифи қаблӣ омода карда шуд. Хулоса, донаҳои сорго се рӯз дар об тар карда шуданд, шуста шуданд, ба колбаҳои конусшакли 1 литр андохта шуданд ва як соат дар ҳарорати 15psi ва 121°C дар автоклав нигоҳ дошта шуданд. Сипас донаҳо бо тақрибан 5 мл миселияи мацератӣ аз фарҳанги тару тозаиБ. кукиLSLP18 изолятсия карда мешавад ва барои 2 ҳафта дар ҳарорати хонагӣ гузошта мешавад ва колбаҳоро ҳар 3 рӯз такон медиҳад. Пас аз 2 ҳафта, донаҳои сорго, ки аз занбӯруғ сироят ёфтаанд, дар ҳаво хушк карда шуданд ва сипас дар ҳарорати 4°C то эмгузаронии саҳроӣ нигоҳ дошта мешаванд. Ҳамон эмгузаронӣ дар тамоми озмоиш истифода мешуд ва ҳар сол тару тоза тайёр карда мешуд. Барои эмгузаронӣ, 6-10 донаҳои сироятёфта ба гиреҳи растаниҳои соргои 4-5 ҳафтаина гузошта шуданд. Спораҳои ҳосилшуда аз ин занбӯруғҳо дар давоми як ҳафта сироятро дар растаниҳои ҷавони сорго ба вуҷуд оварданд.
Омодасозии тухмӣ
Пеш аз шинондан дар саҳро, тухми сорго бо омехтаи фунгитсид, ҳашарот ва сефенер, ки тақрибан 1% фунгитсиди Spirato 480 FS, 4% фунгитсиди Sebring 480 FS, 3% сефенери тухмии Sorpro 940 ES дошт, коркард карда шуд. Сипас тухмиҳо дар ҳаво ба муддати 3 рӯз хушк карда шуданд, ки ин боиси пайдоиши тунуки ин омехта дар атрофи тухмҳо гардид. Сефенер имкон дод, ки гербисид Dual Magnum ҳамчун коркарди пеш аз пайдоиш истифода шавад.
Арзёбии муқовимати доғи барги мақсаднок
SCP дар Истгоҳи тадқиқоти зироатҳои марказӣ дар Клейтон, Каролинаи Шимолӣ аз 14 то 15 июни соли 2017 ва 20 июни соли 2018 дар як тарҳи пурраи тасодуфии блокӣ бо ду такрори таҷрибавӣ дар ҳар як ҳолат шинонда шуд. Таҷрибаҳо дар қаторҳои ягонаи 1,8 м бо паҳнои қатори 0,9 м бо истифода аз 10 тухмӣ дар як қитъа шинонда шуданд. Ду қатори канорӣ дар атрофи ҳар як таҷриба шинонда шуданд, то аз таъсири канорӣ пешгирӣ карда шаванд. Таҷрибаҳо аз 20 июли соли 2017 ва 20 июли соли 2018 эм карда шуданд, ки дар он вақт растаниҳои сорго дар марҳилаи 3-юми афзоиш буданд. Баҳодиҳӣ аз рӯи шкалаи аз як то нӯҳ гирифта шуд, ки дар он растаниҳое, ки аломати беморӣ надоштанд, ҳамчун нӯҳ ва растаниҳои комилан мурда ҳамчун як баҳогузорӣ карда шуданд. Ду баҳодиҳӣ дар соли 2017 ва чор хониш дар соли 2018, ки ҳар сол ду ҳафта пас аз эмгузаронӣ оғоз мешуданд, гирифта шуданд. sAUDPC (масоҳати стандартишуда дар зери каҷи пешрафти беморӣ) тавре ки қаблан тавсиф шуда буд, ҳисоб карда шуд.
Вақти нашр: 01 апрели соли 2021