Ин таҳқиқот марговарӣ, зермарговарӣ ва заҳролудии маҳсулоти тиҷоратиро арзёбӣ кардааст.циперметринформулаҳо барои лаънатҳои ануран. Дар озмоиши шадид, консентратсияҳои 100-800 мкг/л барои 96 соат санҷида шуданд. Дар озмоиши музмин, консентратсияҳои табиии циперметрин (1, 3, 6 ва 20 мкг/л) барои фавт санҷида шуданд, сипас озмоиши микронуклеус ва аномалияҳои ҳастаии ҳуҷайраҳои сурхи хун барои 7 рӯз гузаронида шуд. LC50-и формулаи тиҷоратии циперметрин барои лаънатҳо 273.41 мкг L−1 буд. Дар озмоиши музмин, консентратсияи баландтарин (20 мкг L−1) боиси фавти беш аз 50% гардид, зеро он нисфи лаънатҳои санҷидашударо кушт. Озмоиши микронуклеус натиҷаҳои назаррасро дар 6 ва 20 мкг L−1 нишон дод ва якчанд аномалияҳои ҳастаӣ ошкор карда шуданд, ки нишон медиҳад, ки формулаи тиҷоратии циперметрин дорои потенсиали генотоксикӣ бар зидди P. gracilis мебошад. Киперметрин барои ин намуд хатари баланд дорад, ки нишон медиҳад, ки он метавонад мушкилоти зиёдеро ба вуҷуд орад ва дар кӯтоҳмуддат ва дарозмуддат ба динамикаи ин экосистема таъсир расонад. Аз ин рӯ, метавон хулоса кард, ки формулаҳои тиҷоратии киперметрин ба P. gracilis таъсири заҳролуд доранд.
Аз сабаби густариши пайвастаи фаъолиятҳои кишоварзӣ ва истифодаи босуръати онҳомубориза бо ҳашароти зараррасонДар доираи чораҳо, ҳайвоноти обӣ зуд-зуд ба пеститсидҳо дучор мешаванд1,2. Ифлосшавии захираҳои об дар наздикии киштзорҳои кишоварзӣ метавонад ба рушд ва зинда мондани организмҳои ғайриҳадафӣ, ба монанди амфибияҳо, таъсир расонад.
Амфибияҳо дар арзёбии матритсаҳои муҳити зист аҳамияти бештар пайдо мекунанд. Ануранҳо аз сабаби хусусиятҳои беназири худ, аз қабили давраҳои мураккаби ҳаёт, суръати афзоиши босуръати кирминаҳо, ҳолати трофикӣ, пӯсти гузаранда10,11, вобастагӣ аз об барои афзоиш12 ва тухмҳои муҳофизатнашуда11,13,14, биоиндикаторҳои хуби ифлоскунандаҳои муҳити зист ҳисобида мешаванд. Қурбоққаи хурди обӣ (Physalaemus gracilis), ки маъмулан бо номи қурбоққаи гирён маълум аст, як навъи биоиндикатори ифлосшавии пеститсидҳо4,5,6,7,15 будааст. Ин намуд дар обҳои истода, минтақаҳои ҳифзшуда ё минтақаҳое, ки макони зисти тағйирёбанда доранд, дар Аргентина, Уругвай, Парагвай ва Бразилия1617 пайдо мешавад ва аз рӯи таснифоти IUCN бинобар паҳншавии васеъ ва таҳаммулпазирии он ба маконҳои гуногуни зист18 устувор ҳисобида мешавад.
Дар амфибияҳо пас аз таъсири циперметрин таъсири зерлеталӣ, аз ҷумла тағйироти рафторӣ, морфологӣ ва биохимиявӣ дар тимсоҳҳо23,24,25, тағйирёбии фавт ва вақти метаморфоз, тағйироти ферментативӣ, коҳиши муваффақияти тухмгузорӣ24,25, гиперактивӣ26, боздоштани фаъолияти холинестераза27 ва тағйирот дар самаранокии шиноварӣ7,28 гузориш дода шудааст. Бо вуҷуди ин, таҳқиқоти таъсири генотоксикии циперметрин дар амфибияҳо маҳдуданд. Аз ин рӯ, арзёбии ҳассосияти намудҳои ануран ба циперметрин муҳим аст.
Ифлосшавии муҳити зист ба афзоиш ва инкишофи муқаррарии амфибияҳо таъсир мерасонад, аммо таъсири манфии ҷиддитарин зарари генетикӣ ба ДНК мебошад, ки дар натиҷаи таъсири пеститсидҳо ба вуҷуд меояд13. Таҳлили морфологияи ҳуҷайраҳои хун як биоиндикатори муҳими ифлосшавӣ ва заҳролудшавии эҳтимолии модда барои намудҳои ваҳшӣ29 мебошад. Санҷиши микроядроӣ яке аз усулҳои маъмултарин барои муайян кардани генотоксикии моддаҳои кимиёвӣ дар муҳити зист30 мебошад. Ин як усули зуд, самаранок ва арзон аст, ки нишондиҳандаи хуби ифлосшавии кимиёвии организмҳо ба монанди амфибияҳо31,32 мебошад ва метавонад дар бораи таъсири ифлоскунандаҳои генотоксик маълумот диҳад33.
Ҳадафи ин тадқиқот арзёбии потенсиали заҳролудии формулаҳои тиҷоратии циперметрин барои чилчаҳои хурди обӣ бо истифода аз санҷиши микроядроӣ ва арзёбии хатари экологӣ буд.
Фавти ҷамъшуда (%) дар тадполисҳои P. gracilis, ки дар давраи шадиди санҷиш ба консентратсияҳои гуногуни циперметрин тиҷоратӣ дучор шудаанд.
Фавти ҷамъшуда (%) дар тадполисҳои P. gracilis, ки ҳангоми озмоиши музмин ба консентратсияҳои гуногуни циперметрин тиҷоратӣ дучор шудаанд.
Фавти баланди мушоҳидашуда натиҷаи таъсири генотоксикӣ дар амфибияҳое буд, ки ба консентратсияҳои гуногуни циперметрин (6 ва 20 мкг/л) дучор шудаанд, ки инро мавҷудияти микроядроҳо (MN) ва аномалияҳои ҳастаӣ дар эритроситҳо нишон медиҳанд. Ташаккули MN хатогиҳоро дар митоз нишон медиҳад ва бо пайвастшавии сусти хромосомаҳо ба микронайчаҳо, нуқсонҳо дар комплексҳои сафеда, ки барои ҷаббида ва интиқоли хромосомаҳо масъуланд, хатогиҳо дар ҷудошавии хромосомаҳо ва хатогиҳо дар таъмири осеби ДНК38,39 алоқаманд аст ва метавонад бо стресси оксидшавии аз пеститсид ба вуҷуд омада алоқаманд бошад40,41. Дигар аномалияҳо дар ҳама консентратсияҳои арзёбӣшуда мушоҳида карда шуданд. Афзоиши консентратсияи циперметрин аномалияҳои ҳастаиро дар эритроситҳо мутаносибан дар пасттарин (1 мкг/л) ва баландтарин (20 мкг/л) 5% ва 20% афзоиш дод. Масалан, тағйирот дар ДНК-и як намуд метавонад барои зинда мондани кӯтоҳмуддат ва дарозмуддат оқибатҳои ҷиддӣ дошта бошад, ки боиси коҳиши аҳолӣ, тағйир ёфтани мутобиқати репродуктивӣ, хешутаборӣ, аз даст додани гуногунии генетикӣ ва тағйир ёфтани суръати муҳоҷират мегардад. Ҳамаи ин омилҳо метавонанд ба зинда мондан ва нигоҳдории намудҳо таъсир расонанд42,43. Ташаккули аномалияҳои эритроидӣ метавонад нишонаи басташавии ситокинез бошад, ки боиси тақсимшавии ғайримуқаррарии ҳуҷайраҳо (эритроситҳои дуядроӣ) мегардад44,45; ядроҳои бисёрқисмавӣ баромадҳои мембранаи ҳастаӣ бо қисҳои сершумор мебошанд46, дар ҳоле ки дигар аномалияҳои эритроидӣ метавонанд бо амплификасияи ДНК, ба монанди гурдаҳои ҳастаӣ/блебҳо47, алоқаманд бошанд. Мавҷудияти эритроситҳои ануклеатӣ метавонад нишонаи вайрон шудани интиқоли оксиген, махсусан дар оби олуда48,49, бошад. Апоптоз нишонаи марги ҳуҷайра50.
Таҳқиқоти дигар низ таъсири генотоксикии циперметринро нишон доданд. Кабанья ва ҳамкоронаш51 мавҷудияти тағйироти микроядроҳо ва ҳастаӣ, ба монанди ҳуҷайраҳои дуядроӣ ва ҳуҷайраҳои апоптотикиро дар ҳуҷайраҳои Odontophrynus americanus пас аз таъсири консентратсияи баланди циперметрин (5000 ва 10,000 мкг L−1) барои 96 соат нишон доданд. Апоптози аз ҷониби циперметрин ба вуҷуд омада низ дар P. biligonigerus52 ва Rhinella arenarum53 ошкор карда шуд. Ин натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки циперметрин ба як қатор организмҳои обӣ таъсири генотоксикӣ дорад ва таҳлили MN ва ENA метавонад нишондиҳандаи таъсири зерлеталӣ ба амфибияҳо бошад ва метавонад ба намудҳои маҳаллӣ ва популятсияҳои ваҳшии дучоршуда ба токсикантҳо12 татбиқ карда шавад.
Формулаҳои тиҷоратии циперметрин хатари баланди экологӣ (ҳам шадид ва ҳам музмин) доранд, ки HQ-ҳо аз сатҳи Агентии ҳифзи муҳити зисти ИМА (EPA)54 зиёдтаранд, ки агар дар муҳити зист мавҷуд бошанд, метавонанд ба намудҳо таъсири манфӣ расонанд. Дар арзёбии хатари музмин, NOEC барои фавт 3 мкг L−1 буд, ки тасдиқ мекунад, ки консентратсияҳои дар об мавҷудбуда метавонанд барои намудҳо хатар эҷод кунанд55. NOEC-и марговар барои кирминаҳои R. arenarum, ки ба омехтаи эндосульфан ва циперметрин дучор шудаанд, пас аз 168 соат 500 мкг L−1 буд; ин арзиш пас аз 336 соат то 0,0005 мкг L−1 коҳиш ёфт. Муаллифон нишон медиҳанд, ки ҳар қадар таъсири он дарозтар бошад, консентратсияҳое, ки барои намудҳо зарароваранд, ҳамон қадар пасттар мешаванд. Инчунин қайд кардан муҳим аст, ки арзишҳои NOEC дар ҳамон вақти таъсири он нисбат ба арзишҳои P. gracilis баландтар буданд, ки нишон медиҳад, ки вокуниши намудҳо ба циперметрин ба намудҳо хос аст. Ғайр аз ин, аз нигоҳи фавт, арзиши CHQ-и P. gracilis пас аз таъсири циперметрин ба 64.67 расид, ки аз арзиши истинодии муқарраркардаи Агентии ҳифзи муҳити зисти ИМА54 баландтар аст ва арзиши CHQ-и кирминаҳои R. arenarum низ аз ин арзиш баландтар буд (CHQ > 388.00 пас аз 336 соат), ки нишон медиҳад, ки инсектисидҳои омӯхташуда барои якчанд намудҳои амфибияҳо хатари баланд доранд. Бо назардошти он, ки P. gracilis барои ба итмом расонидани метаморфоз тақрибан 30 рӯз лозим аст56, метавон хулоса кард, ки консентратсияҳои омӯхташудаи циперметрин метавонанд ба коҳиши аҳолӣ тавассути пешгирии ворид шудани шахсони сироятшуда ба марҳилаи калонсолӣ ё репродуктивӣ дар синни барвақт мусоидат кунанд.
Дар арзёбии хавфи ҳисобшудаи микроядроҳо ва дигар аномалияҳои ҳастаии эритроситҳо, арзишҳои CHQ аз 14.92 то 97.00 буданд, ки нишон медиҳад, ки циперметрин хатари эҳтимолии генотоксикӣ барои P. gracilis ҳатто дар муҳити табиии он дорад. Бо назардошти фавт, консентратсияи максималии пайвастагиҳои ксенобиотикӣ, ки ба P. gracilis таҳаммулпазиранд, 4.24 мкг L−1 буд. Аммо, консентратсияҳои то 1 мкг/л низ таъсири генотоксикӣ нишон доданд. Ин далел метавонад боиси афзоиши шумораи афроди ғайримуқаррарӣ57 гардад ва ба рушд ва такрористеҳсоли намудҳо дар муҳити зисти онҳо таъсир расонад ва боиси коҳиши популятсияҳои амфибияҳо гардад.
Формулаҳои тиҷоратии циперметрин дар инсектисид заҳролудии шадид ва музмини баландро ба P. gracilis нишон доданд. Сатҳи баланди фавт мушоҳида шуд, ки эҳтимолан аз таъсири заҳролудӣ вобаста аст, ки инро мавҷудияти аномалияҳои ядроии микроядроҳо ва эритроситҳо, бахусус ядроҳои дандоншакл, ядроҳои лобшакл ва ядроҳои везикулярӣ нишон медиҳанд. Илова бар ин, намудҳои таҳқиқшуда хатарҳои экологӣ, ҳам шадид ва ҳам музминро, нишон доданд. Ин маълумот, дар якҷоягӣ бо таҳқиқоти қаблии гурӯҳи тадқиқотии мо, нишон доданд, ки ҳатто формулаҳои гуногуни тиҷоратии циперметрин то ҳол боиси коҳиши фаъолияти ацетилхолинэстераза (AChE) ва бутирилхолинэстераза (BChE) ва стресси оксидативӣ58 шудаанд ва боиси тағйирот дар фаъолияти шиноварӣ ва нуқсонҳои даҳон59 дар P. gracilis шудаанд, ки нишон медиҳад, ки формулаҳои тиҷоратии циперметрин барои ин намуд заҳролудии марговар ва зерлеталӣ доранд. Хартманн ва ҳамкорон 60 муайян карданд, ки формулаҳои тиҷоратии циперметрин дар муқоиса бо нӯҳ пестисиди дигар барои P. gracilis ва дигар намуди ҳамон ҷинс (P. cuvieri) заҳрноктарин буданд. Ин нишон медиҳад, ки консентратсияҳои аз ҷиҳати қонунӣ тасдиқшудаи циперметрин барои ҳифзи муҳити зист метавонанд боиси фавти баланд ва коҳиши дарозмуддати аҳолӣ шаванд.
Барои арзёбии заҳролудии пеститсид ба амфибияҳо таҳқиқоти бештар лозиманд, зеро консентратсияҳои дар муҳити зист мавҷудбуда метавонанд боиси фавти баланд шаванд ва хатари эҳтимолӣ барои P. gracilis дошта бошанд. Таҳқиқот дар бораи намудҳои амфибияҳо бояд ташвиқ карда шаванд, зеро маълумот дар бораи ин организмҳо, бахусус дар бораи намудҳои бразилӣ, камёбанд.
Санҷиши заҳролудии музмин дар шароити статикӣ 168 соат (7 рӯз) давом кард ва консентратсияҳои зерлеталӣ чунин буданд: 1, 3, 6 ва 20 мкг ai L−1. Дар ҳарду таҷриба, 10 чилча барои як гурӯҳи табобатӣ бо шаш такрор арзёбӣ карда шуданд, ки дар маҷмӯъ 60 чилча барои як консентратсияро ташкил медод. Дар айни замон, коркарди танҳо бо об ҳамчун назорати манфӣ хизмат мекард. Ҳар як дастгоҳи таҷрибавӣ аз як зарфи шишагии стерилизатсияшуда бо иқтидори 500 мл ва зичии 1 чилча барои 50 мл маҳлул иборат буд. Барои пешгирӣ аз бухоршавӣ колба бо плёнкаи полиэтиленӣ пӯшонида шуда буд ва пайваста ҳаво дода мешуд.
Барои муайян кардани консентратсияи пеститсидҳо дар 0, 96 ва 168 соат, об аз ҷиҳати кимиёвӣ таҳлил карда шуд. Мувофиқи маълумоти Сабин ва дигарон 68 ва Мартинс ва дигарон 69, таҳлилҳо дар Лабораторияи таҳлили пеститсидҳо (LARP)-и Донишгоҳи федералии Санта Мария бо истифода аз хроматографияи газӣ ва спектрометрияи массавии сегонаи квадруполӣ (модели Varian 1200, Пало Алто, Калифорния, ИМА) анҷом дода шуданд. Муайян кардани миқдории пеститсидҳо дар об ҳамчун маводи иловагӣ нишон дода шудааст (Ҷадвали SM1).
Барои санҷиши микроядроӣ (MNT) ва санҷиши аномалияи ҳастаии ҳуҷайраҳои сурх (RNA), 15 гӯсфанди гӯсфанди аз ҳар як гурӯҳи табобатӣ таҳлил карда шуданд. Гӯсфанди гӯсфанди 5% лидокаин (50 мг г-170) наркоз карда шуд ва намунаҳои хун бо истифода аз сӯзандоруҳои якдафъаинаи гепаринӣ бо роҳи пунксияи дил ҷамъоварӣ карда шуданд. Ташхисҳои хун дар слайдҳои микроскопи стерилизатсияшуда омода карда шуданд, дар ҳаво хушк карда шуданд, бо 100% метанол (4°C) барои 2 дақиқа фиксатсия карда шуданд ва сипас бо маҳлули 10% Giemsa барои 15 дақиқа дар торикӣ ранг карда шуданд. Дар охири раванд, слайдҳо бо оби тозашуда шуста шуданд, то доғи зиёдатиро тоза кунанд ва дар ҳарорати хонагӣ хушк карда шуданд.
Ҳадди ақал 1000 ҳуҷайраҳои сурхи хун аз ҳар як мурғча бо истифода аз микроскопи 100× бо ҳадафи 71 барои муайян кардани мавҷудияти MN ва ENA таҳлил карда шуданд. Дар маҷмӯъ 75,796 ҳуҷайраҳои сурхи хун аз мурғча бо назардошти консентратсияи циперметрин ва гурӯҳи назоратӣ арзёбӣ карда шуданд. Генотоксикӣ мувофиқи усули Карраско ва дигарон ва Фенех ва дигарон38,72 бо муайян кардани басомади осебҳои зерини ҳастаӣ таҳлил карда шуд: (1) ҳуҷайраҳои ядроӣ: ҳуҷайраҳои бе ядроҳо; (2) ҳуҷайраҳои апоптозӣ: фрагментатсияи ҳастаӣ, марги барномарезишудаи ҳуҷайра; (3) ҳуҷайраҳои ду ядроӣ: ҳуҷайраҳо бо ду ядро; (4) ғунчаҳои ҳастаӣ ё ҳуҷайраҳои блеб: ҳуҷайраҳо бо ядроҳо бо баромадгоҳҳои хурди пардаи ҳастаӣ, блебҳо аз ҷиҳати андоза ба микроядроҳо монанд; (5) ҳуҷайраҳои кариолизшуда: ҳуҷайраҳо бо танҳо контури ядро бе маводи дохилӣ; (6) ҳуҷайраҳои чуқурчадор: ҳуҷайраҳо бо ядроҳо бо тарқишҳо ё сӯрохиҳои намоён дар шакли худ, ки онро ядроҳои шакли гурда низ меноманд; (7) ҳуҷайраҳои лобулӣ: ҳуҷайраҳо бо барҷастагиҳои ҳастаӣ, ки аз везикулаҳои дар боло зикршуда калонтаранд; ва (8) микроҳуҷайраҳо: ҳуҷайраҳо бо ядроҳои фишурдашуда ва ситоплазмаи коҳишёфта. Тағйирот бо натиҷаҳои манфии назорат муқоиса карда шуданд.
Натиҷаҳои санҷиши заҳролудии шадид (LC50) бо истифода аз нармафзори GBasic ва усули TSK-Trimmed Spearman-Karber74 таҳлил карда шуданд. Маълумоти санҷиши музмин пешакӣ аз рӯи меъёрияти хатогӣ (Шапиро-Вилкс) ва якхелагии дисперсия (Бартлетт) санҷида шуданд. Натиҷаҳо бо истифода аз таҳлили яктарафаи дисперсия (ANOVA) таҳлил карда шуданд. Санҷиши Туки барои муқоисаи маълумот байни худ ва санҷиши Даннет барои муқоисаи маълумот байни гурӯҳи табобатӣ ва гурӯҳи назорати манфӣ истифода шуд.
Маълумоти LOEC ва NOEC бо истифода аз санҷиши Даннетт таҳлил карда шуданд. Санҷишҳои оморӣ бо истифода аз нармафзори Statistica 8.0 (StatSoft) бо сатҳи аҳамиятнокии 95% (p < 0.05) анҷом дода шуданд.
Вақти нашр: 13 марти соли 2025