Ин тадқиқот марговарӣ, сублеталӣ ва заҳролудшавии тиҷоратро арзёбӣ кардаасткиперметринформулаҳо ба tadpoles anuran. Дар озмоиши шадид, консентратсияи 100-800 мкг / л барои 96 соат санҷида шуд. Дар санҷиши музмин, консентратсияи киперметринҳои табиатан пайдошуда (1, 3, 6 ва 20 мкг/л) барои фавт санҷида шуданд, пас санҷиши микронуклеус ва нуқсонҳои ядроии ҳуҷайраҳои сурхи хун дар тӯли 7 рӯз. LC50-и формулаи тиҷории киперметрин ба табақаҳо 273,41 мкг L-1 буд. Дар санҷиши музмин, консентратсияи баландтарин (20 мкг L-1) боиси беш аз 50% фавт гардид, зеро он нисфи кӯзаҳои санҷидашударо куштааст. Санҷиши микронуклеус дар 6 ва 20 мкг L-1 натиҷаҳои назаррас нишон дод ва якчанд нуқсонҳои ҳастаӣ ошкор карда шуданд, ки формулаи тиҷории киперметрин дорои потенсиали генотоксикии зидди P. gracilis мебошад. Циперметрин барои ин намуд хатари баланд дорад ва нишон медиҳад, ки он метавонад мушкилоти зиёдеро ба вуҷуд орад ва ба динамикаи ин экосистема дар кӯтоҳмуддат ва дарозмуддат таъсир расонад. Аз ин рӯ, метавон хулоса кард, ки формулаҳои тиҷории киперметрин ба P. gracilis таъсири заҳролуд доранд.
Ба шарофати пай дар пай вусъат додани корхои хочагии кишлок ва ба кор бурдани интенсивиимуборизаи зидди хашароти зараррасонтадбирхое, ки хайвоноти обй зуд-зуд ба пестисидхо дучор мешаванд1,2. Ифлосшавии захираҳои об дар наздикии майдонҳои кишоварзӣ метавонад ба рушд ва зинда мондани организмҳои ғайриҳадаф ба монанди амфибияҳо таъсир расонад.
Амфибияҳо дар арзёбии матритсаҳои муҳити зист аҳамияти бештар пайдо мекунанд. Ануранҳо аз сабаби хусусиятҳои беназири худ, аз қабили давраҳои мураккаби ҳаёт, суръати афзоиши босуръати кирмҳо, ҳолати трофикӣ, пӯсти гузаранда10,11, вобастагӣ аз об барои такрористеҳсол12 ва тухмҳои муҳофизатнашаванда11,13,14, ануранҳо биоиндикаторҳои хуби ифлоскунандаи муҳити зист ҳисобида мешаванд. Қурбоққаи хурди обӣ (Physalaemus gracilis), ки маъмулан бо номи қурбоққаи гиря маъруф аст, як намуди биоиндикатори ифлосшавии пестисидҳо мебошад4,5,6,7,15. Ин намуд дар обҳои доимӣ, минтақаҳои муҳофизатшаванда ё минтақаҳои зисти тағйирёбанда дар Аргентина, Уругвай, Парагвай ва Бразилия1617 вомехӯрад ва аз рӯи таснифи IUCN аз сабаби паҳншавии васеъ ва таҳаммулпазирии маконҳои гуногун устувор ҳисобида мешавад18.
Дар амфибияҳо пас аз дучор шудан ба киперметрин, аз ҷумла тағироти рафтор, морфологӣ ва биохимиявӣ дар табақаҳо23,24,25, тағирёбии фавт ва вақти метаморфоз, тағиротҳои ферментативӣ, коҳиши муваффақияти инкубатсия24,25, гиперфаъолият26, ҷилавгирӣ аз фаъолияти холиназаҳо278 таъсироти сублеталӣ ба қайд гирифта шудаанд. Аммо, таҳқиқоти таъсири генотоксикии киперметрин дар амфибияҳо маҳдуд аст. Аз ин рӯ, баҳодиҳии ҳассосияти намудҳои ануран ба киперметрин муҳим аст.
Ифлосшавии муҳити зист ба афзоиш ва рушди мӯътадили амфибияҳо таъсир мерасонад, аммо таъсири ҷиддии манфии он осеби генетикӣ ба ДНК мебошад, ки аз таъсири пестисидҳо ба вуҷуд омадааст13. Таҳлили морфологияи ҳуҷайраҳои хун як нишондиҳандаи муҳими ифлосшавӣ ва заҳролудшавии эҳтимолии модда ба намудҳои ваҳшӣ мебошад29. Санҷиши микронуклеус яке аз усулҳои маъмултарин барои муайян кардани генотоксик будани моддаҳои кимиёвӣ дар муҳити зист мебошад30. Ин як усули зуд, муассир ва арзон аст, ки нишондиҳандаи хуби ифлосшавии кимиёвии организмҳо ба монанди амфибияҳо мебошад31,32 ва метавонад дар бораи таъсири ифлоскунандаи генотоксик маълумот диҳад33.
Ҳадафи ин тадқиқот баҳодиҳии потенсиали заҳролудшавии формулаҳои тиҷории киперметрин ба қубурҳои хурди обӣ бо истифода аз санҷиши микронуклеус ва арзёбии хатари экологӣ буд.
Миқдори фавти ҷамъшуда (%)-и палангҳои P. gracilis, ки ба консентратсияи гуногуни киперметринҳои тиҷоратӣ дар давраи шадиди санҷиш дучор шудаанд.
Миқдори фавти ҷамъшуда (%)-и P. gracilis, ки ба консентратсияи гуногуни киперметринҳои тиҷоратӣ ҳангоми санҷиши музмин дучор шудаанд.
Сатҳи баланди фавти мушоҳидашуда натиҷаи таъсири генотоксикӣ дар амфибияҳо буд, ки ба консентратсияи гуногуни киперметрин (6 ва 20 мкг/л) дучор шуда буданд, ки аз мавҷудияти микронуклеаҳо (МН) ва нуқсонҳои ядроӣ дар эритроситҳо шаҳодат медиҳанд. Ташаккули MN хатогиҳоро дар митоз нишон медиҳад ва бо пайвасти сусти хромосомаҳо ба микротубулҳо, нуқсонҳо дар комплексҳои сафеда, ки барои гирифтан ва интиқоли хромосома масъуланд, хатогиҳо дар ҷудокунии хромосомаҳо ва хатогиҳо дар таъмири зарари ДНК38,39 ва метавонанд бо фишори оксиди аз пеститсидҳо алоқаманд бошанд40,41. Норасоиҳои дигар дар ҳама консентратсияи арзёбӣшуда мушоҳида карда шуданд. Афзоиши консентратсияи киперметрин дар вояи пасттарин (1 мкг/л) ва баландтарин (20 мкг/л) нуқсонҳои ядроиро дар эритроситҳо мутаносибан 5% ва 20% зиёд кард. Масалан, тағирот дар ДНК-и як намуд метавонад барои зинда мондани кӯтоҳмуддат ва дарозмуддат оқибатҳои ҷиддӣ дошта бошад, ки боиси коҳиши популятсия, тағирёбии қобилиятҳои репродуктивӣ, нассоҷӣ, аз байн рафтани гуногунии генетикӣ ва тағирёбии суръати муҳоҷират мегардад. Ҳамаи ин омилҳо метавонанд ба зинда мондан ва нигоҳдории намудҳо таъсир расонанд42,43. Ташаккули нуқсонҳои эритроидӣ метавонад блоки ситокинезро нишон диҳад, ки дар натиҷа тақсимоти ғайримуқаррарии ҳуҷайраҳо (эритроситҳои бинуклеатӣ) 44,45; ядроҳои бисёрҷабба баромадҳои мембранаи ядроӣ бо лобҳои сершумор мебошанд46, дар ҳоле ки дигар нуқсонҳои эритроидӣ метавонанд бо амплификацияи ДНК алоқаманд бошанд, ба монанди гурдаҳои ядроӣ/блбҳо47. Мавҷудияти эритроситҳои нуклеатсияшуда метавонад аз интиқоли оксиген, махсусан дар оби олудашуда шаҳодат диҳад48,49. Апоптоз марги ҳуҷайраҳоро нишон медиҳад50.
Дигар тадқиқотҳо инчунин таъсири генотоксикии киперметринро нишон доданд. Kabaña et al.51 мавҷудияти микронуклеиҳо ва тағироти ядроиро ба монанди ҳуҷайраҳои бинуклеатӣ ва ҳуҷайраҳои апоптозӣ дар ҳуҷайраҳои Odontophrynus americanus пас аз дучор шудан ба консентратсияи баланди cypermethrin (5000 ва 10,000 мкг L-1) барои 96 соат нишон доданд. Дар P. biligonigerus52 ва Rhinella arenarum53 низ апоптоз ба циперметрин муайян карда шуд. Ин натиҷаҳо аз он шаҳодат медиҳанд, ки киперметрин ба як қатор организмҳои обӣ таъсири генотоксикӣ дорад ва таҳлили MN ва ENA метавонад нишондиҳандаи таъсири сублеталӣ ба амфибияҳо бошад ва метавонад ба намудҳои маҳаллӣ ва популяцияҳои ваҳшӣ, ки ба токсикантҳо дучор мешаванд, татбиқ карда шавад12.
Таркиби тиҷории киперметрин хатари баланди экологиро (ҳам шадид ва ҳам музмин) ба вуҷуд меорад, ки HQ аз сатҳи Агентии ҳифзи муҳити зисти ИМА (EPA) зиёдтар аст54, ки агар дар муҳити зист мавҷуд бошад, метавонад ба намудҳо таъсири манфӣ расонад. Дар арзёбии хатари музмин, NOEC барои фавт 3 мкг L-1 буд, ки тасдиқ мекунад, ки консентратсияи дар об мавҷудбуда метавонад ба намудҳо хатар эҷод кунад55. NOEC марговар барои Тухми R. arenarum, ки ба омехтаи эндосульфан ва киперметрин дучор шудаанд, пас аз 168 соат 500 мкг L-1 буд; ин арзиш пас аз 336 соат то 0,0005 мкг L-1 коҳиш ёфт. Муаллифон нишон медиҳанд, ки чӣ қадаре, ки таъсири он дарозтар бошад, консентратсияи ба намудҳо зараровар камтар мешавад. Инчунин қайд кардан муҳим аст, ки арзишҳои NOEC дар як лаҳзаи таъсири P. gracilis баландтар буданд ва нишон медиҳанд, ки вокуниши намуд ба киперметрин хоси намуд аст. Ғайр аз он, аз нуқтаи назари фавт, арзиши CHQ-и P. gracilis пас аз таъсири киперметрин ба 64,67 расид, ки аз арзиши истинодӣ, ки Агентии ҳифзи муҳити зисти ИМА муқаррар кардааст54 ва арзиши CHQ кирми R. arenarum низ аз ин арзиш баландтар буд (CHQ > 3833), инсектисидҳо барои якчанд намуди амфибияҳо хатари калон доранд. Бо назардошти он, ки P. gracilis барои анҷом додани метаморфоз тақрибан 30 рӯзро талаб мекунад56, метавон ба хулосае омад, ки консентратсияи омӯхташудаи киперметрин бо роҳи пешгирии воридшавии шахсони сироятшуда ба марҳилаи калонсолон ё репродуктивӣ дар синни барвақт ба коҳиши аҳолӣ мусоидат мекунад.
Ҳангоми арзёбии хатари ҳисобшудаи микронуклеҳо ва дигар нуқсонҳои ядроии эритроситҳо, арзишҳои CHQ аз 14,92 то 97,00 буданд, ки ин нишон медиҳад, ки киперметрин ҳатто дар муҳити табиии худ хатари эҳтимолии генотоксикӣ барои P. gracilis дорад. Бо назардошти фавт, консентратсияи максималии пайвастагиҳои ксенобиотики ба P. gracilis тоқатшаванда 4,24 мкг L−1 буд. Аммо, консентратсияи то 1 мкг/л паст низ таъсири генотоксикӣ нишон дод. Ин далел метавонад боиси афзоиши шумораи фардҳои ғайримуқаррарӣ 57 гардад ва ба инкишоф ва такрористеҳсоли намудҳо дар макони зисти онҳо таъсир расонад, ки боиси кам шудани шумораи амфибияҳо гардад.
Сохторҳои тиҷории инсектисидҳои cypermethrin ба P. gracilis заҳролудшавии шадид ва музмини баланд нишон доданд. Сатҳи баланди фавт, эҳтимол аз таъсири заҳролуд ба мушоҳида мерасид, ки аз мавҷудияти нуқсонҳои ядроии микронуклеҳо ва эритроситҳо, махсусан ядроҳои сердор, ядроҳои лобдор ва ядроҳои везикулярӣ шаҳодат медиҳанд. Илова бар ин, намудҳои омӯхташуда хатарҳои экологии шадид ва музминро нишон доданд. Ин маълумотҳо дар якҷоягӣ бо таҳқиқоти қаблии гурӯҳи тадқиқотии мо нишон доданд, ки ҳатто шаклҳои гуногуни тиҷоратии киперметрин то ҳол боиси кам шудани фаъолияти ацетилхолинестераза (AChE) ва бутирилхолинэстераза (BChE) ва фишори оксидивӣ шуданд58 ва боиси тағирёбии фаъолияти шиноварӣ ва нуқсонҳои даҳонӣ59 дар формулаҳои P. gracilis, нишон медиҳанд, ки дорои хосиятҳои баланди тиҷоратӣ мебошанд. заҳролудшавӣ ба ин намуд. Хартман ва дигарон. 60 муайян кардааст, ки таркибҳои тиҷоратии киперметрин дар муқоиса бо нӯҳ пеститсидҳои дигар барои P. gracilis ва як намуди дигари ҳамон ҷинс (P. cuvieri) заҳролудтарин буданд. Ин аз он шаҳодат медиҳад, ки консентратсияи қонунан тасдиқшудаи киперметрин барои ҳифзи муҳити зист метавонад боиси марги зиёд ва коҳиши дарозмуддати аҳолӣ гардад.
Барои арзёбии заҳролудии пестисидҳо ба амфибияҳо таҳқиқоти минбаъда лозим аст, зеро консентратсияи дар муҳити зист пайдошуда метавонад боиси марги зиёд ва хатари эҳтимолии P. gracilis бошад. Тадқиқот оид ба намудҳои амфибияҳо бояд ташвиқ карда шавад, зеро маълумот дар бораи ин организмҳо, махсусан дар бораи намудҳои Бразилия, кам аст.
Санҷиши музмини заҳролудшавӣ дар шароити статикӣ 168 соат (7 рӯз) давом кард ва консентратсияи сублеталӣ инҳо буданд: 1, 3, 6 ва 20 мкг ai L−1. Дар ҳарду таҷриба, 10 табақа барои як гурӯҳи муолиҷа бо шаш такрор баҳогузорӣ карда шуд, ки дар маҷмӯъ 60 табақа барои як консентратсия. Дар ҳамин ҳол, табобати танҳо об ҳамчун назорати манфӣ хизмат мекард. Ҳар як дастгоҳи таҷрибавӣ аз як табақи шишагини стерилӣ бо иқтидори 500 мл ва зичии 1 табақча барои 50 мл маҳлул иборат буд. Колбаро барои пешгирй кардани бухоршавй бо плёнкаи полиэтиленй пушонда, пай дар пай аэрация мекарданд.
Об барои муайян кардани консентратсияи пестисидҳо дар 0, 96 ва 168 соат аз ҷиҳати кимиёвӣ таҳлил карда шуд. Ба гуфтаи Сабин ва дигарон. 68 ва Мартинс ва дигарон. 69, таҳлилҳо дар Лабораторияи таҳлили пеститсидҳо (LARP) Донишгоҳи федералии Санта-Мария бо истифода аз хроматографияи газ дар якҷоягӣ бо масс-спектрометрияи сегонаи чоркупол (модели Вариан 1200, Пало Алто, Калифорния, ИМА) гузаронида шуданд. Муайянкунии миқдории пеститсидҳо дар об ҳамчун маводи иловагӣ нишон дода шудааст (Ҷадвали SM1).
Барои санҷиши микронуклеус (MNT) ва санҷиши аномалияти ядроии ҳуҷайраҳои сурх (РНК), 15 табақа аз ҳар як гурӯҳи табобатӣ таҳлил карда шуд. Тадполҳо бо 5% лидокаин (50 мг г-170) наркоз карда шуданд ва намунаҳои хун тавассути пунксияи дил бо истифода аз сӯзандоруҳои гепаринизатсияшуда ҷамъ карда шуданд. Сметаҳои хун дар слайдҳои стерилизатсияи микроскоп омода карда шуданд, дар ҳаво хушк карда шуданд, бо 100% метанол (4 ° C) барои 2 дақиқа собит карда шуданд ва сипас бо маҳлули 10% Giemsa барои 15 дақиқа дар торикӣ ранг карда шуданд. Дар охири раванд, слайдҳо бо оби тозашуда шуста шуданд, то доғи зиёдатӣ тоза карда шаванд ва дар ҳарорати хонагӣ хушк карда шаванд.
Бо истифода аз микроскопи 100 × бо ҳадафи 71 барои муайян кардани мавҷудияти MN ва ENA ҳадди аққал 1000 RBC аз ҳар як табақа таҳлил карда шуд. Ҳамагӣ 75,796 эритроситҳо аз табақаҳо бо назардошти консентратсияи киперметрин ва назорат баҳогузорӣ карда шуданд. Генотоксикӣ мувофиқи усули Карраско ва дигарон таҳлил карда шуд. ва Fenech et al.38,72 бо муайян кардани басомади осебҳои ядроии зерин: (1) ҳуҷайраҳои ануклеатӣ: ҳуҷайраҳои бе ядро; (2) ҳуҷайраҳои апоптозӣ: порашавии ядроӣ, марги барномавии ҳуҷайра; (3) ҳуҷайраҳои бинуклеатӣ: ҳуҷайраҳои ду ядроӣ; 4) навдаи ядрої ё њуљайрањои блбї: њуљайрањое, ки ядроњо доранд, бо баромадњои хурди мембранаи ядрої, блбањои њаљмашон ба микронуклеяњо монанд; (5) њуљайрањои кариолизшуда: њуљайрањое, ки танњо контури ядро бе маводи дохилї доранд; 6) ҳуҷайраҳои нохундор: ҳуҷайраҳое, ки ядроҳои дорои тарқишҳо ё тарқишҳои аён дар шакли худ, инчунин ядроҳои гурдашакл номида мешаванд; (7) ҳуҷайраҳои лобулӣ: ҳуҷайраҳои дорои баромадҳои ядроӣ аз весикулаҳои дар боло зикршуда калонтар; ва (8) микроэлементҳо: ҳуҷайраҳои дорои ядроҳои конденсатшуда ва ситоплазмаи камшуда. Тағйирот бо натиҷаҳои назорати манфӣ муқоиса карда шуданд.
Натиҷаҳои санҷиши заҳролудшавии шадид (LC50) бо истифода аз нармафзори GBasic ва усули TSK-Trimmed Spearman-Karber74 таҳлил карда шуданд. Маълумоти озмоишии музмин барои муқаррарии хатогӣ (Шапиро-Уилкс) ва якхела будани дисперсия (Бартлетт) пешакӣ санҷида шуд. Натиҷаҳо бо истифода аз таҳлили яктарафаи дисперсия (ANOVA) таҳлил карда шуданд. Санҷиши Тукей барои муқоисаи додаҳо байни худ истифода шуд ва санҷиши Даннет барои муқоисаи маълумот байни гурӯҳи табобатӣ ва гурӯҳи назорати манфӣ истифода шуд.
Маълумоти LOEC ва NOEC бо истифода аз санҷиши Даннет таҳлил карда шуданд. Санҷишҳои оморӣ бо истифода аз нармафзори Statistica 8.0 (StatSoft) бо сатҳи аҳамияти 95% (p <0,05) анҷом дода шуданд.
Вақти фиристодан: 13 март-2025