Протеинҳои DELLA устоди ҳифз шудаандтанзимкунандагони афзоишки дар назорати рушди растанӣ дар посух ба сигналҳои дохилӣ ва муҳити зист нақши марказӣ доранд. DELLA ҳамчун танзимгари транскриптӣ амал мекунад ва тавассути пайвастшавӣ ба омилҳои транскрипсия (TFs) ва гистон H2A тавассути домени GRAS худ барои промоутерҳои мақсаднок ҷалб карда мешавад. Тадқиқотҳои охирин нишон доданд, ки устувории DELLA пас аз тарҷума тавассути ду механизм танзим карда мешавад: полиубиквитинатсия, ки аз ҷониби фитогормон гиббереллин ба вуҷуд омадааст, ки боиси таназзули босуръати он мегардад ва конъюгацияи тағирдиҳандаҳои хурди ба убикутин монанд (SUMO) барои зиёд кардани ҷамъшавии он. Илова бар ин, фаъолияти DELLA бо ду гликозилизатсияи гуногун динамикӣ танзим карда мешавад: таъсири мутақобилаи DELLA-TF тавассути О-фукозилизатсия такмил дода мешавад, аммо бо тағирёбии ба O-асетилглюкозамин (O-GlcNAc) алоқаманд монеъ мешавад. Бо вуҷуди ин, нақши фосфоризатсияи DELLA норавшан боқӣ мемонад, зеро таҳқиқоти қаблӣ натиҷаҳои ба ҳам зид нишон доданд, аз он ҷумла нишон медиҳанд, ки фосфоризатсия таназзули DELLA-ро ба дигарон мусоидат мекунад ё коҳиш медиҳад ва нишон медиҳад, ки фосфоризатсия ба устувории он таъсир намерасонад. Дар ин ҷо, мо маконҳои фосфоризатсияро дар РЕПРЕССОР муайян мекунемга1-3(RGA, AtDELLA) аз Arabidopsis thaliana тавассути таҳлили масс-спектрометрӣ тоза карда шудааст ва нишон медиҳад, ки фосфоризатсияи ду пептидҳои RGA дар минтақаҳои PolyS ва PolyS/T ба пайвастшавии H2A ва фаъолнокии мукаммали RGA мусоидат мекунад. Ассотсиатсияи RGA бо промоутерҳои мақсаднок. Қобили зикр аст, ки фосфоризатсия ба таъсири мутақобилаи RGA-TF ё устувории RGA таъсир намерасонад. Таҳқиқоти мо механизми молекулавиро ошкор мекунад, ки тавассути он фосфоризатсия ба фаъолияти DELLA мусоидат мекунад.
Барои равшан кардани нақши фосфоризатсия дар танзими функсияи DELLA, муайян кардани маконҳои фосфоризатсияи DELLA дар vivo ва гузаронидани таҳлилҳои функсионалӣ дар растаниҳо муҳим аст. Бо тозакунии наздикии иқтибосҳои растанӣ ва пас аз таҳлили MS/MS, мо дар RGA якчанд фосфоситҳоро муайян кардем. Дар шароити норасоии ГА, фосфоризатсияи RHA зиёд мешавад, аммо фосфоризатсия ба устувории он таъсир намерасонад. Муҳим он аст, ки таҳлилҳои co-IP ва ChIP-qPCR нишон доданд, ки фосфоризатсия дар минтақаи PolyS/T-и RGA ба мутақобилаи он бо H2A ва робитаи он бо промоутерҳои мақсаднок мусоидат намуда, механизмеро, ки тавассути он фосфоризатсия функсияи RGA-ро ба вуҷуд меорад, ошкор мекунад.
RGA барои ҳадафи хроматин тавассути ҳамкории зердомени LHR1 бо TF ҷалб карда мешавад ва сипас ба H2A тавассути минтақаи PolyS/T ва зердомени PFYRE пайваст шуда, маҷмӯи H2A-RGA-TF-ро барои мӯътадил кардани RGA ташкил медиҳад. Фосфоризатсияи Pep 2 дар минтақаи PolyS/T байни домени DELLA ва домени GRAS тавассути киназаи номаълум пайвастагии RGA-H2A-ро тақвият медиҳад. Протеини мутантии rgam2A фосфоризатсияи RGA-ро бекор мекунад ва конформатсияи сафедаи дигарро қабул мекунад, то ба пайвастшавии H2A халал расонад. Ин боиси ноустувории мутақобилаи муваққатии TF-rgam2A ва ҷудошавии rgam2A аз хроматини мақсаднок мегардад. Ин рақам танҳо репрессияи транскрипсияи тавассути RGA-ро тасвир мекунад. Намунаи шабеҳро метавон барои фаъолсозии транскрипсияи RGA тавсиф кард, ба истиснои он, ки маҷмӯи H2A-RGA-TF ба транскрипсияи генҳои мақсаднок мусоидат мекунад ва дефосфоризатсияи rgam2A транскрипсияро коҳиш медиҳад. Тасвир аз Huang et al.21 тағир дода шудааст.
Ҳама маълумоти миқдорӣ бо истифода аз Excel ба таври оморӣ таҳлил карда шуданд ва фарқиятҳои назаррас бо истифода аз санҷиши Student's t муайян карда шуданд. Барои пешакӣ муайян кардани андозаи интихоб ягон усули оморӣ истифода нашудааст. Ягон маълумот аз таҳлил хориҷ карда нашудааст; таҷриба тасодуфӣ набуд; муҳаққиқон аз тақсими маълумот дар давоми таҷриба ва арзёбии натиҷаҳо кӯр набуданд. Андозаи намуна дар тасвири тасвир ва файли маълумоти манбаъ нишон дода шудааст.
Барои маълумоти бештар дар бораи тарҳрезии омӯзиш, ба Реферати Ҳисоботи Табиии Портфолио, ки бо ин мақола алоқаманд аст, нигаред.
Маълумоти протеомикаи масс-спектрометрӣ ба консорсиуми ProteomeXchange тавассути анбори шарики PRIDE66 бо идентификатори маҷмӯи додаҳо PXD046004 саҳм гузошта шудааст. Ҳама маълумоти дигаре, ки дар давоми ин тадқиқот ба даст оварда шудаанд, дар Маълумоти иловагӣ, Файлҳои иловагии маълумот ва Файлҳои маълумоти хом оварда шудаанд. Маълумоти манбаъ барои ин мақола оварда шудааст.
Вақти фиристодан: Ноябр-08-2024