Протеинҳои DELLA устоди нигоҳдорӣ мебошандтанзимгарони афзоишки дар назорати рушди растанӣ дар посух ба нишонаҳои дохилӣ ва муҳити зист нақши марказӣ доранд. DELLA ҳамчун танзимгари транскрипсия амал мекунад ва тавассути пайвастшавӣ ба омилҳои транскрипсия (TFs) ва гистони H2A тавассути домени GRAS-и худ барои ҳадафгирии промоутерҳо ҷалб карда мешавад. Тадқиқотҳои ахир нишон доданд, ки устувории DELLA пас аз тарҷума тавассути ду механизм танзим карда мешавад: полиубиквитинизатсия, ки аз ҷониби фитогормон гиббереллин ба вуҷуд меояд, ки боиси вайроншавии босуръати он мегардад ва конъюгасияи модификаторҳои хурди монанд ба убиквитин (SUMO) барои афзоиши ҷамъшавии он. Илова бар ин, фаъолияти DELLA бо ду гликозилизатсияи гуногун ба таври динамикӣ танзим карда мешавад: таъсири мутақобилаи DELLA-TF бо O-фукозилизатсия афзоиш меёбад, аммо бо тағирёбии N-ацетилглюкозамини бо O пайвастшуда (O-GlcNAc) бозмедорад. Бо вуҷуди ин, нақши фосфорилизатсияи DELLA норавшан боқӣ мемонад, зеро таҳқиқоти қаблӣ натиҷаҳои мухолифро нишон доданд, аз онҳое, ки фосфорилизатсия вайроншавии DELLA-ро мусоидат ё коҳиш медиҳад, то дигарон, ки нишон медиҳанд, ки фосфорилизатсия ба устувории он таъсир намерасонад. Дар ин ҷо, мо маконҳои фосфорилизатсияро дар РЕПРЕССОР муайян мекунем.га1-3(RGA, AtDELLA) аз Arabidopsis thaliana бо таҳлили спектрометрияи массавӣ тоза карда шуданд ва нишон доданд, ки фосфорилизатсияи ду пептиди RGA дар минтақаҳои PolyS ва PolyS/T пайвастшавии H2A-ро афзоиш медиҳад ва фаъолияти RGA-ро беҳтар мекунад. Алоқамандии RGA бо промоторҳои мақсаднок. Қобили зикр аст, ки фосфорилизатсия ба таъсири мутақобилаи RGA-TF ё устувории RGA таъсир намерасонад. Тадқиқоти мо механизми молекулавиро ошкор мекунад, ки тавассути он фосфорилизатсия фаъолияти DELLA-ро ба вуҷуд меорад.
Барои равшан кардани нақши фосфорилизатсия дар танзими функсияи DELLA, муайян кардани маконҳои фосфорилизатсияи DELLA дар in vivo ва анҷом додани таҳлилҳои функсионалӣ дар растаниҳо муҳим аст. Бо роҳи тозакунии аффинитети экстрактҳои растанӣ ва баъдан таҳлили MS/MS, мо якчанд фосфоситҳоро дар RGA муайян кардем. Дар шароити норасоии GA, фосфорилизатсияи RHA меафзояд, аммо фосфорилизатсия ба устувории он таъсир намерасонад. Муҳим он аст, ки таҳлилҳои co-IP ва ChIP-qPCR нишон доданд, ки фосфорилизатсия дар минтақаи PolyS/T-и RGA таъсири мутақобилаи онро бо H2A ва робитаи онро бо промоторҳои мақсаднок афзоиш медиҳанд ва механизмеро ошкор мекунанд, ки фосфорилизатсия функсияи RGA-ро ба вуҷуд меорад.
RGA тавассути таъсири мутақобилаи зердомени LHR1 бо TF барои ҳадаф қарор додани хроматин ҷалб карда мешавад ва сипас тавассути минтақаи PolyS/T ва зердомени PFYRE ба H2A пайваст мешавад ва комплекси H2A-RGA-TF-ро ташкил медиҳад, то RGA-ро устувор созад. Фосфоркунонии Pep 2 дар минтақаи PolyS/T байни домени DELLA ва домени GRAS аз ҷониби киназаи номаълум пайвастшавии RGA-H2A-ро тақвият медиҳад. Протеини мутантии rgam2A фосфоркунонии RGA-ро қатъ мекунад ва конформатсияи дигари сафедаро қабул мекунад, то ба пайвастшавии H2A халал расонад. Ин боиси ноустувории таъсири мутақобилаи муваққатии TF-rgam2A ва ҷудошавии rgam2A аз хроматини мақсаднок мегардад. Ин расм танҳо фишори транскрипсияи тавассути RGA-ро нишон медиҳад. Намунаи монандро барои фаъолсозии транскрипсияи тавассути RGA тавсиф кардан мумкин аст, ба истиснои он ки комплекси H2A-RGA-TF транскрипсияи гени мақсаднокро мусоидат мекунад ва дефосфоркунонии rgam2A транскрипсияро коҳиш медиҳад. Расми аз Huang et al.21 тағйирёфта.
Ҳамаи маълумоти миқдорӣ бо истифода аз Excel аз ҷиҳати оморӣ таҳлил карда шуданд ва фарқиятҳои назаррас бо истифода аз санҷиши t-и Студент муайян карда шуданд. Барои муайян кардани пешакии андозаи намуна ягон усули оморӣ истифода нашуд. Ҳеҷ маълумот аз таҳлил хориҷ карда нашуд; таҷриба тасодуфӣ набуд; муҳаққиқон дар тақсимоти маълумот ҳангоми таҷриба ва арзёбии натиҷаҳо нодида нагирифтанд. Андозаи намуна дар афсонаи расм ва файли маълумоти манбаъ нишон дода шудааст.
Барои гирифтани маълумоти бештар дар бораи тарҳи тадқиқот, ба Хулосаи гузориши портфели табиӣ, ки бо ин мақола алоқаманд аст, нигаред.
Маълумоти протеомикаи спектрометрияи массавӣ ба консорсиуми ProteomeXchange тавассути анбори шарикии PRIDE66 бо идентификатори маҷмӯи додаҳо PXD046004 ворид карда шудааст. Ҳама маълумоти дигаре, ки дар давоми ин таҳқиқот ба даст оварда шудаанд, дар Маълумоти иловагӣ, Файлҳои маълумоти иловагӣ ва Файлҳои маълумоти хом пешниҳод шудаанд. Маълумоти манбаъ барои ин мақола пешниҳод шудааст.
Вақти нашр: 08 ноябри соли 2024